CC BY
70
В1сник Дтпропетровського унiверситету. Бюлопя, медицина Visnik Dnipropetrovs'kogo universitetu. Seria Biologia, medicina Visnyk of Dnepropetrovsk University. Biology, medicine
Visn. Dnipropetr. Univ. Ser. Biol. Med. 2014. 5(2), 125-130.
ISSN 2310-4155 print ISSN 2312-7295 online
doi:10.15421/021424
www.medicine.dp.ua
УДК 599.32+615.9
Ефектившсть застосування ентеросгелю в умовах одночасного ураження щурiв карбофосом i тетрахлорметаном
Л.А. Бойко, Л.С. Фiра, П.Г. Лихацький
ДВНЗ "Тернотльський державниймедичнийyuieepcnmem Шеш 1.Я. ГорбачевськогоМОЗ Украгни", Тернотль, Украгна
Одночасне ураження щурш карбофосом i тетрахлорметаном викликае акшващю процесш лтопероксидацп, поглиблення ендо-генно1 штоксикаци, на що вказуе пiдвищений вмтст молекул середньоi маси у сироватщ кровi та печiнцi щурш, а також зумовлюе розвиток деструктивних процесш у печiнцi, свiдченням чому е висока активтсть трансмiназ у сироватщ кровг Вiдмiчене зниження активностi ацетилхолшестерази у кровi, що свiдчигь про токсичний вплив карбофосу на гiдролiз ацетилхолiну та пiдвищення збу-дливосп нервовоi системи. Застосування ентеросгелю проявило позитивний вплив на виявлеш порушенння в ураженому органiзмi.
Ключов слова: молекули середньоi маси; амнотрансфераза; лужна фосфатаза; ацетилхолiнестераза
SHEI "I.Y. Horbachevsky Ternopil State Medical University of the Ministry of Public Health of Ukraine", Ternopil, Ukraine
The aim of our study was to examine the effectiveness of the enterosgel sorbent in the terms of simultaneous destruction of rats by karbofos and carbon tetrachloride. Experiments were carried out on white rats weighing 175-200 g, which were kept on a standard diet. Karbofos was administered intragastrically on daily basis in the aqueous solution at the rate of 20 mg/kg of the body weight, which is 1/10 of the LD50. Carbon tetrachloride was administered intraperitoneally, twice a day in the form of a 50% oil solution at a dose of 1.0 ml/kg of animal. Animals received enterosgel daily by intragastric way at the rate of 120 mg/kg of body weight. The activity of free radical processes in rats was assessed by thiobarbituric acid content - active products (TBA-AP) in serum, liver and heart homogenates. Level of endogenous intoxication was determined by the content of average weight molecules (AWM) in serum and liver homogenate. The degree of cytolysis of hepatocytes was assessed by the activity of alanine and aspartate aminotransferase (AlAT, AsAT), alkaline phosphatase (ALP) in serum, liver and heart homogenates. The degree of damage of the nervous system was studied by the activity of acetylcholinesterase (AChE) in serum and liver homogenate. Content of TBA-AP in serum, liver and myocardium increased throughout the period of study. Reduction of TBA-AP was observed in studied tissues after applying of enterosgel sorbent in the affected body. After the defeat by toxicants we showed significant increase of fraction of AM1 (chain aminoacids dominate) and AM2 (aromatic aminoacids dominate) in serum and liver of experimental rats throughout the experiment. Enterosgel showed a positive effect on this index, reducing the content of MSM molecules. Due to toxic effects of endogenous and exogenous toxins in cells degradation and changing the permeability of plasma membranes of hepatocytes was observed as evidenced by the increased activity of both AlAT and AsAT in serum and decreased in liver and myocardium. Throughout the experiment a positive effect of enterosgel on these indices was observed, which activity decreased in serum and increased in liver and myocardium. Another marker of hepatic cytolysis is alkaline phosphatase, which activity increase in serum shows the development of inflammation in the liver. It is noted that after enterosgel introduction into the body affected by xenobiotics ALP activity decreases. The main pathogenetic mechanism of karbofos action is based on the inhibition of AChE - an enzyme that catalyzes the hydrolysis of acetylcholine and plays an important role in synaptic transmission of nerve impulses. Throughout the experiment, under the action of toxicants, decreasing of the AChE
ДВНЗ «Тернотльський державний медичний утверситет Шен 1.Я. Горбачевського МОЗ Украши», вул. Майдан Волг, 1, Тернотль, 46001, Украгна.
HSEI "Ternopil State Medical University by I.Y. Horbachevsky of MPH of Ukraine", Freedom Square str., 1, 46001, Ternopil, Ukraine. Tel.: +38-096-377-63-90. E-mail: ludafira@mail.ru
Effectiveness of enterosgel usage in the conditions of simultaneous destruction of rats by karbofos and carbon tetrachloride
L.A. Boyko, L.S. Fira, P.G. Lychatskiy
activity took place, and when injecting into the affected body enterosgel we observed increased activity of the enzyme. Thus, the usage of enterosgel resulted in the depressing process of free radical oxidation, reduction of endogenous intoxication and decrease in the inflammation in the rats affected by xenobiotics, allowing to carry out subsequent studies of the efficiency of this sorbent under conditions of chemical poisoning.
Keywords: average weight molecules; aminotransferases; alkaline phosphatase; acetylcholinesterase
Вступ
Xim3a^a промисловосп та сшьського господарства спричинила зростання впливу хишчних токсинв на органзм людини та тварин. Це зумовлено значним за-брудненням навколишнього середовища рiзними пестицидами. Серед них одними i3 нaйгоксичнiших сполук е карбофос i тетрахлорметан (Walewsky et al., 2003; Vo-ronko, 2004). Дат ксенобютики, залежно вщ умов, можуть порушувати рiвновaIу мiж окиснювальними процесами та захисними системами в оргатзм! Утворенi при цьому токсини поглиблюють ендогенну iнгоксикaцiю та можуть викликати токсичне ураження печшки - органа, який вiдiIрaе головну роль у регуляцц обмшу речовин цшсного орIaнiзму. Для усунення прояв1в ендогенно! iнтоксикaцii застосовують сорбенти. Сорбенти видаляють токсини iз просвiту кишечника, очищують трaвнi соки шлунково-кишкового тракту, здшснюють зворотний па-саж токсинв i метаболтв iз кровi, модифжують лшщний та aмiнокислотний спектри вмiсту кишечника (Zhminko et al., 2003, Bondarev et al., 2008).
Метою нашого дослвдження було вивчити ефективнiсть застосування сорбенту ентеросгелю в умо-вах одночасного ураження щурiв карбофосом та тетра-хлорметаном.
Матерiал i методи дослщжень
Дослвди проведенi на бших щурах масою тша 175200 г, яких утримували на стандартному рацют в1вар1к> ДВНЗ «Тернотльський державний медичний унiверситет iм. 1.Я. Горбачевського». Виконували !х зпдно iз Загаль-ними принципами експерименпв на тваринах, схвалени-ми на Нац1ональному конIресi з бюетики (Кив, 2001). Утримання тварин i мантуляцп з ними проводили зпдно з положеннями стaгтi 26 Закону Укра!ни «Про захист тварин вщ жорстокого поводження» вщ 21.02.2006 р. № 3447-IV, «Свропейсько! конвенцii' про захист хребет-них тварин, що використовуються для дослвдних та нау-кових цшей», «Загальних етичних принцитв експерименпв на тваринах», затверджених 20.09.2001 р. I Укра!нським нац1ональним конгресом 1з бюетики та з урахуванням положень, викладених у NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (Guide, 2011).
Тварин подшили на дев'ять груп:
1 - iнтaктний контроль,
2 - тварини, урaженi карбофосом протягом 10 даб та 4-та доба ураження тетрахлорметаном,
3 - ураження, як у 2-i' групи та тсля застосування ентеросгелю,
4 - 10 д16 ураження карбофосом та 7-ма доба отруен-
ня СС14,
5 - щури, урaженi карбофосом протягом 10 даб та 7-ма доба розвитку токсичного гепатиту (тварини ще! групи отримували ентеросгель протягом 10 д16),
6 - щури, уражет карбофосом протягом 30 дiб та 4-та доба розвитку тетрахлорметанового гепатиту,
7 - щури, яю тсля ураження токсикантами, як у по-переднш груш, та пiсля отримування ентеросгелю протягом усього експерименту,
8 - 30 д1б уведення карбофосу та 7-ма доба ураження СС14,
9 - уражеш щури, як у 8-й груш, та тсля 30-добового уведення ентеросгелю.
Карбофос уводили щоденно внутршньошлунково у вигляд водного розчину з розрахунку 20 мг/кг маси тiла тварини, що становить 1/10 ввд LD50. Тетрахлорметан уводили внутрiшньочеревинно, дворазово - через добу у вигляд 50% олшного розчину у дозi 1,0 мл/кг маси тварини (Gubskiy et al., 2005). Ентеросгель тварини отримували щоденно штрагастрально з розрахунку 120 мг/кг маси тша. Дозу щдбирали емтрично, виходячи iз середньотерапевтично1 дози для людей i перерахунку ïï на тварин (Rybolovlev, 1979).
Щурiв поддавали евтаназiï з використанням тюпенталу натрш. Для дослщжень обрали сироватку кровi, мiокард i печшку тварин. Кров забирали iз серця тварин, яку центрифугували зi швик1стю 3 000 об./хв протягом 30 хвилин. Отриману сироватку кровi (надоса-дову рвдину) використовували для проведення досл1джень. Ввдбрану печiнку та серце (250 мг) використовували для отримання гомогенату методом диференцшного гомогенiзування, яке проводили пiсля попередньоï перфузiï з 2,5 мл фiзiологiчного розчину.
Активнiсть вiльнорадикальних процес1в в органiзмi шурiв оц1нювали за вмктом кислотних тюбарбгтур-активних продукпв (ТБК-АП) у сироватцi кровi, гомоге-натах печшки та серця. У лшвдних системах унаслвдок процесiв перекисного окиснення лшвдв утворюеться малоновий дiальдегiд (МДА), взаемод1я якого iз 2-тюбарбгтуровою кислотою викликае утворення хромогену з максимумом поглинання у червонiй обласп видимого спектра при довжиш хвил1 535 нм. Вмiст МДА визначали з урахуванням коефiцiента молярноï екстинкцп утвореного хромогену i виражали у мкмоль/л для кровi та в мкмоль/кг для тканинних гомогенапв (Kolb et al., 1982; Lushchak et al., 2004).
Cтупiнь ендогенноï штоксикацп визначали за вмiстом молекул середньоï маси (МСМ) у сироватщ кровi та гомогенатi печiнки. Метод полягае у видшент кислоторозчинноï фракцп молекул середньоï маси з на-ступною детекцiею десятикратно розведеноï надосадовоï рiдини при довжинах хвиль 254 та 280 нм проти дистильованоï води на СФ-46. Результати виражали в одиницях, чисельно р1вних показникам екстинкцп (Niko-laichik et al., 1989).
Стутнь цитол1зу гепатоцитв оцшювали за активностями аланiн- та аспартатамшотрансфераз (АлАТ, АсАТ) i лужноï фосфатази (ЛФ) у сироватцi кров^ гомогенатах печiнки та серця. Визначення АлАТ проводили шляхом амiнування 2-оксоглютаровоï кислоти L-аланiном, яке вщбуваеться щд даею аланiнамiнотрансферази, утворю-
roTbca L-rnyiaMiHOBa Ta nipoBUHorpagHa khcioth. 3a B3a-eMogiï nBK i3 2,4-gHHïrpo$eHiirigpa3HHOM y nyxHOMy cepegoBH^i yTBoproroTbca 2,4-gHHnpo$emirigpa3OHH, ^o Marorb bhcokhh Koe^^era MOiapHOi екстннцiï, TOMy on-THHHa ^inbmcrb ïx, aKa peecrpyerbca Ha ®EKy, npaMO пpопоpцiннa aKTHBHOCTÎ $epMemy. P03paxyH0K aKTHB-Hocri ^epMemy npoBogunu 3a Kani6pyBaibHHM rpa^iKOM, noôygoBaHHM 3a bmîctom nBK, i Bupaxanu b MKMoni>/(i^rog) (Reitman, 1957). Bu3HaneHHa AcAT 6a3yBanoca Ha BHMipMBaHHi onTHHHOï rycTHHH 2,4-Hirpo$eHiirigpa3OHiB 2-0KC0raroTap0B0ï Ta nipoBHHorpagHoï khciot y nyxHOMy cepegoBH^i. OcKiibKH rigpa3OH nipoBHHorpagHoï khcioth Mae bh^hh Koe^^era MonapHoï e^^H^i, cnocrepira-erbca npaMa 3aiexHicrb omHHHoï ryciHHH peaKqiâHoro po3HHHy Big aKTHBHOcri ^epMemy. P03paxyH0K aKTHBHOcri $epMemy npoBogunu 3a Kani6pyBaibHHM rpa^iKOM, no6y-goBaHHM 3a BMicTOM nBK, i Bupaxanu b MKMOib/(i^rog) (Reitman, 1957). Bu3HaneHHa aKTHBHOcri nyxHoï 4>oc$ara3H rpymyBanoca Ha BiacrHBocri $epMemy rigpoii3yBara e^ipHHÔ 3B'a3OK y p-raiцеpо$оc$aтi 3 Big^enneHHaM $oc$araoï khcioth. ®oc$op BH3HanaiH KOiopuMerpHHHHM MerogoM 3a pea^ero 3 MOii6geHOBHM peaKTHBOM 3a npu-cyTHocri BigHOBHHKa eHKOHoreHy a6o acK0p6iH0B0ï khcioth. npogyKT peaKqiï - MOii6geHOBHH cumn, ÎHieHcHBHicrb 3a-6apBieHHa aKoro пpопоpцmнa KinbKocri $oc$opy y npo6i Ta xapaKTepu3ye aKTHBHicib ^epMemy (Kind, 1954).
OrymHb ypaxeHHa HepBOBOi cucreMH BHBHanu 3a arcra-BHicrro aqerHnxogiHecrepa3H (AXE) y cupoBar^ KpoBi Ta
Ha 30- Ta 7-My go6y eBegeHHa tokchmb BMicr TEK-An 3pocTaB ^e 6inbme i BuaBHBca Ha piBHi 234%. TaKe nigBH^eHHH BMicry garnoï cnonyKH y cнpовaтцi KpoBi cBigwib npo aKTHBaqiM BiibHopagHKaibHHx пpоцeciв b opraHi3Mi ypaxeHux rnypiB nig BniHBOM BUKopucraHux TOKcHKaHiiB. npu 3acrocyBaHHi cop6eHiy emepocrenro b ypaxeHOMy opraHi3Mi cnocrepiraeTbca 3MeHmeHHa BMicry TEK-An y cнpовaтцi KpoBi: npu 10-go6oBOMy yBegeHHi
roMoreHari neHÎHKH, aKy Bupaxanu b MiKporpaMax aqerug-xoniHy, ^o rigponi3yBaBca, Ha 1 mi cupoBaiKH KpoBi a6o
roMoreHary neniHKH 3a 1 xBHiuHy. nig nac peaKqiï aqeTHi-
xoniHy 3 nyxHHM po3hhhom rigpoKcHiaMiHxiopHgy yTBO-proeTbca rigp0Kc0M0Ba KuciOTa, aKa b KuciOMy cepegoBH-^i 3 xiopHHM 3aii3OM gae KonbopoBy peaK^M, ^o 3ane-xurb Big ^^empa^i aqeruixoiiHy. BuMproBanu omuH-Hy rycTHHy gocnigHoï npo6u Ha ®EKy 3a goBxuHH xBHii 540 hm (Yermolayeva et al., 2008).
OTaTHCTHHHy o6po6Ky orpuMaHux gaHux npoBoguiu ciaHgapTHHMH MerogaMH BapiaqiHHOï craracrHKH, po3pa-xoByBaTH cepegHi BenrnuHH, ïx noxu6KH, gocroBipHicTb BigMiHHocri o6HuciroBaiH i3 3acrocyBaHHaM t-Kpurepiro OTbrogeHia (Lapach et al., 2000), 3mîhh BBa^aiu gocroBipHHMH npu P < 0,05.
PeîymTara Ta ïx oôroBopeHHH
y TBapuH, ypa^eHux KceHo6ioTHKaMH, bmîct TEK-An y cupoBa^i KpoBi 3pociaB npoiaroM ycboro TepMiHy gociig^eHHa (Ta6i. 1). Ha 10-Ty go6y ypa^eHHa Kap6o$o-com Ta 4-ry go6y OTpyeHHH TerpaxiopMeiaHOM BMicT TEK-An 3pic Ha 42%, y BunagKy gecaTugeHHoï ÎHTOKcHKaqiï Kap6o$ocoM i Ha 7-My go6y yBegeHHH TerpaxiopMeraHy gaHHH noKa3HHK 36iibmHBca Ha 85%. nicia 30-geHHoro yBegeHHH Kap6o$ocy Ta Ha 4-ry go6y OTpyeHHa CCI4 BMicT TEK-An 3pic y cнpовaтцi KpoBi Ha 185%.
Kap6o$ocy Ta Ha 4-Ty go6y ypa^eHHa CCI4 nicia 3aciocy-BaHHa cop6eHiy BMicT TEK-An 3HH3HBca Ha 18%.
npu 10-go6oBiâ iнтокcнкaцiï Kap6o$ocoM Ta Ha 7-My go6y yBegeHHa TerpaxiopMeiaHy nig BniHBOM eHTepocre-ik> gociig^yBaHHH noKa3HHK 3MeHmuBca Ha 27%. nicia 30-go6oBoro yBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4-ry go6y orpyeHHa CCI4 eHTepocreib 3HH3HB BMicT TEK-An Ha 29%, BignoBigHO Ha 30-ry Ta 7-My go6y yBegeHHa tokchhîb
Taônu^ 1
^HHaMÏKa SioxiMÎHHnx MOKa^unKiB y ciipoiiarni KpoBi rnypiB, ogHonacHo ypa^eHHx KapSo^ocoM i TeTpax^opMeTaHOM, nie^n KopcKniï eHTepocreaeM (M ± m)
noKa3HHK iHraKTHHH koht pont, n = 6 TepMiH gocnigxeHHa, go6a
10 + 4 CCI4 10 + 7 CCI4 30 + 4 CCI4 30 + 7 CCI4
ypaxeHi, n = 6 KopeKuia, n = 6 ypaxeHi, n = 6 KopeKuia, n = 6 ypaxeHi, n = 6 KopeKHia, n = 6 ypaxeHi, n = 6 коpeкцia, n = 6
TEK-An, mkmoWi 0,92 ± 0,03 1,31 ± 0,02* 1,14 ± 0,01** 1,70 ± 0,01* 1,45 ± 0,01** 2,62 ± 0,02* 2,36 ± 0,01** 3,07 ± 0,01* 2,79 ± 0,01**
OMi , y. o./i 0,99 ± 0,10 1,62 ± 0,02* 0,96 ± 0,01** 1,79 ± 0,03* 1,17 ± 0,01** 2,20 ± 0,02* 1,33 ± 0,01** 2,30 ± 0,02* 1,52 ± 0,01**
OM2 , y. o./i 1,11 ± 0,16 1,68 ± 0,01* 1,18 ± 0,01** 1,90 ± 0,03* 1,24 ± 0,01** 2,13 ± 0,01* 1,54 ± 0,01** 2,18 ± 0,02* 1,75 ± 0,01**
AiAT, mkmoil / (i rog.) 1,17 ± 0,01 1,62 ± 0,02* 1,42 ± 0,01** 1,98 ± 0,02* 1,55 ± 0,01** 2,07 ± 0,01* 1,57 ± 0,01** 2,12 ± 0,01* 2,81 ± 0,01**
AcAT, mkmoil / (i-rog.) 0,78 ± 0,03 1,25 ± 0,05* 0,96 ± 0,01** 1,71 ± 0,03* 1,51 ± 0,01** 1,75 ± 0,03* 1,52 ± 0,01** 1,80 ± 0,03* 1,57 ± 0,01**
^O, mmoil/i 14,20 ± 0,80 15,67 ± 0,30 14,25 ± 0,01** 17,10 ± 0,24* 15,70 ± 0,01** 19,70 ± 0,27* 17,26 ± 0,01** 21,88 ± 0,16* 19,72 ± 0,02**
AXE, MKr/xB 230,00 ± 1,12 185,60 ± 0,96* 223,60 ± 0,84** 165,80 ± 0,90* 191,60 ± 0,95** 156,70 ± 0,51* 173,60 ± 1,12* 151,50 ± 0,93* 167,60 ± 0,58**
npuMimKu: TyT i b HaciynHHx Ta6iuuax 10 Ta 30 OOO - ypaxeHHa Kap6o^ocoM npoiaroM 10 Ta 30 gi6, 4 Ta 7 CCl4 - ypaxeHHa TerpaxiopMeiaHOM Ha 4- Ta 7-My go6y, * - BiporigHi (P < 0,05) 3MiHH Mix TBapHHaMH iHTaKTHoro Kompoiro Ta ypaxeHHMH, ** -BiporigHi (P < 0,05) 3MiHH Mix ypaxeHHMH TBapHHaMH Ta TBapHHaMH, aKi OTpuMyBaiu eHTepocreit.
nig BngHBoM Kopuryronoro HHHHHKa noKa3HHK 3MeHmHBca Ha 31% BigHocHo ypa^eHux TBapuH.
npu ogHonacHÎH giï Ha opraHi3M rnypiB Kap6o$ocy Ta TerpaxgopMeraHy aKTHByroTbca пpoцесн BigbHo-paguKagbHoro oKucHeHHa, a tokchhh npogyKTH, aKi npm uboMy yTBoproroTbca, cnpuHHHaroTb gecrpyKTHBHHH BngHB Ha MaKpoMogeKygm, hhm norgu6groroTb eHgoreHHy imoKCHKaqiK) opraHi3My, npo cryniHb aKoï cygarb 3a BMicroM y снpoвaтцi KpoBi MCM. nicga ypa^eHHa tokch-KaHTaMH mh BigMirugH gocToBipHe nigBH^eHHa ^paKqiH CM1 (nepeBa^aroTb gaHuroroBi aMiHoKHcgoTH) Ta CM2 (nepeBa^aroTb apoMaruHHi aMiHoKHcgoTH) y cupoBarui KpoBi gocgigHHx rnypiB npoiaroM ycboro eKcnepuMeHiy (Ta6g. 1). npu 10-go6oBoMy orpyeHHi Kap6o$ocoM i Ha 4-Ty go6y ypa^eHHH CCI4 nicga yBegeHHa eHTepocregro BMicr CM1 y cupoBarui KpoBi 3HH3HBca b 1,7 pa3a, CM2 - b 1,4 pa3a. y HacrynHHH TepMiH gocgig^eHHa (10 gi6 ypa-®eHHH Kap6o$ocoM i 7 gi6 orpyeHHa TerpaxgopMeTaHoM) BMicr ^paKuin CMi i CM2 3HH3HBca b 1,5 pa3a. nicga 30-go6oBoro BBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4-ry go6y orpyeHHa CCI4 BMicT CMi 3HH3HBca b 1,6 pa3a, CM2 - b 1,4 pa3a. y rnypiB, aKi orpuMyBagu eHTepocregb, nopiBHaHo 3 ypa^eHHMH ^ypaMH, Ha 30- Ta 7-My go6y yBegeHHa TOKCHKamiB - CM1 3HH3HBca b 1,5 pa3a, CM2 - b 1,2 pa3a. TaKHM hhhom, b ypa^eHHx TBapuH nicga BBegeHHa cop6eH-Ty 3HH®yBaBca BMicT MCM y cupoBarui KpoBi npoiaroM ycboro eKcnepuMeHry.
OgHonacHo gocgig^yBagu KopuryBagbHHH BngHB eHTepocregro Ha cTaH nga3MarHHHHx MeM6paH renarouHiiB. ,3ga uboro BH3Hanagu aKTHBHicTb AgAT, AcAT y cupoBarui KpoBi. BHacgigoK gecrpyKqiï Ta 3MiHH npoHHKHocri nga3MaiHHHHx MeM6paH KgiTHH neHHKH nicga ypa^eHHa ToKcHKamaMH nigBH^yBagacb aKTHBHicTb aK AgAT, TaK i AcAT y cupoBarui KpoBi. Цe cBigwib, ^o nig BnguBoM Kap6o$ocy Ta TerpaxgopMeraHy Big6yBaerbca UHiogi3 renaiouHiiB i nepeMi^eHHa ^epMemiB y KpoB.
^aHi ^ogo aKTHBHocri aMiHorpaHc$epa3 HaBegeHo b Ta6guui 1. yBegeHHa b ypa^eHHH opraHi3M eHTepocregro BHKguKae 3HH®eHHa gaHux noKa3HHKiB npoiaroM ycboro TepMiHy gocgig^eHHa. npu 10-go6oBoMy yBegeHHi Kap6o-$ocy Ta Ha 4-ry go6y nicga ypa^eHHa CCI4 aKTHBHicTb AgAT y cupoBarui KpoBi 3HH3ugaca Ha 17%, AcAT - Ha 37%. npu 10-go6oBin imoKcHKauiï Kap6o$ocoM i Ha 7-My go6y yBegeHHa TerpaxgopMeraHy noKa3HHKH 3HH3ugucb TaKHM hhhom: AgAT - Ha 37%, AcAT - Ha 26% nicga 30-go6oBoro yBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4-Ty go6y oipyeHHa CCI4 aKTHBHicTb AgAT 3HH3ugaca Ha 43%, AcAT - Ha 29%. Ha 30- Ta 7-My go6y BBegeHHa tokchhIb cnocrepiragu 3HH®eHHa aKTHBHocri aMÎHorpaHc$epa3: AgAT - Ha 59%, AcAT - Ha 30% BigHocHo piBHa ypa^e-Hux TBapuH. TaKHM hhhom, npoiaroM ycboro eKcnepuMeH-Ty cnocrepiragu 3HH®eHHa aKTHBHocri aMiHorpaHc$epa3 y cupoBaTui KpoBi nicga yBegeHHa b ypa^eHHH TOKcHKama-mh opraHi3M eHTepocregro. 3mîhh 6ygu BiporigHHMH y Bci TepMiHH gocgig^eHHa.
^e ogHHM MapKepoM uHiogi3y renarouHiiB e H®, nigBH^eHHa aKTHBHocri aKoï y cupoBarui KpoBi cBigHHTb npo po3BHroK 3anagbHoro npouecy y nenmui (Ta6g. 1). yBegeHHa b ypa^eHHH KceHo6ioTHKaMH opraHi3M eHTepocregro 3HH®ye aKTHBHicTb H®. npu 10-go6oBoMy BBegeHHi Kap6o$ocy Ta Ha 4- i 7-My go6y ypa^eHHa CCI4 nicga 3a-ciocyBaHHa eHTepocregro aKTHBHicTb H® 3HH3ugaca Ha
10%. nicga 30-go6oBoro yBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4-ry go6y orpyeHHa CCI4 eHTepocregb 3HH3HB aKTHBHicTb H® Ha 17%, BignoBigHo Ha 30- Ta 7-My go6y yBegeHHa tokchhIb noKa3HHK 3HH3HBca Ha 15% BigHocHo ypa^eHux TBapuH.
Ochobhhh naToreHeTHHHHH MexaHi3M giï Kap6o$ocy rpymyeTbca Ha npurHineHHi aKTHBHocri AXE - ^epMemy, ^o Kaiagi3ye rigpogi3 aueiugxogiHy Ta Bigirpae Ba^gHBy pogb y npoueci cHHanrHHHoï nepegani HepBoBoro iMnygbcy. 13 gaHux Ta6guui 1 BugHo, ^o npoiaroM ycboro eKcnepuMeHry 3a giï TOKcHKamÎB Big6yBagocb 3HH®eHHa aKTHBHocri AXE, npu yBegeHHi b ypa^eHHH opraHi3M eHTepocregro cnociepiragu nigBH^eHHa aKTHBHocri gaHoro ^epMeHiy. npu 10-go6oBoMy yBegeHHi Kap6o$ocy Ta Ha 4-ry go6y ypa^eHHa CCI4 npu yBegeHHi KopuryBagbHoro HHHHHKa aKTHBHicTb AXE nigBH^ugaca Ha 16,6%. npu 10-go6oBin iHTOKcHKaqiï Kap6o$ocoM i Ha 7-My go6y yBegeHHa TerpaxgopMeraHy noKa3HHK 3pic Ha 11,0%. nicga 30-go6oBoro yBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4- Ta 7-My go6y orpyeHHa CCI4 npu yBegeHHi eHTepocregro aKTHBHicTb gaHHoro $epMemy nigBH^ugacb Ha 7,0% BigHocHo piBHa ypa^eHux TBapuH, ^o nigiBepg^ye KopuryBagbHi BgacTHBocTi 3acTocoBaHoro HaMH cop6eHTy.
y xogi eKcnepuMeHry gocgig^yBagu neniHKy TBapuH, ypa^eHux Bu^eBKa3aHHMH KceHo6ioTHKaMH. y niggocgig-hhx mypiB cnocrepiragu nigBH^eHHa BMicry npoMi^Hux npogyKTiB BigbHopagHKagbHoro oKHcHeHHa (Ta6g. 2). yBe-geHHa b ypa^eHHH opraHi3M eHTepocregro BHKguKago 3hh-®eHHa BMicry TEK-An. npu 10-go6oBoMy yBegeHHi Kap-6o$ocy Ta Ha 4-Ty go6y ypa^eHHa CCI4 BMicT TEK-An 3HH3HBca Ha 16,0% nicga 3acTocyBaHHa eHTepocregro. npu 10-go6oBin iHToKcHKauiï Kap6o$ocoM i Ha 7-My go6y yBegeHHa TeTpaxgopMeTaHy noKa3HHK 3MeHmHBca Ha 9,0%. nicga 30-go6oBoro yBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4-Ty go6y orpyeHHa CCI4 3a BBegeHHa eHTepocregro BMicr TEK-An 3HH3HBca Ha 16,0%, BignoBigHo Ha 30- Ta 7-My go6y yBegeHHa TOKcHHiB noKa3HHK 3MeHmHBca Ha 14,0% BigHocHo ypa^eHux TBapuH.
npu ypa^SHHi TBapHH ToKcuKaHraMH BigMineHe gocToBipHe nigBH^eHHa BMicry ^paKqin CM1 Ta CM2 y neniHui niggocgigHux ^ypiB. y neniHui ypa^eHux TBapHH yBegeHHa KopuryBagbHoro HHHHHKa 3HH®yBago bmIct MCM npo-TaroM ycboro eKcnepuMeHiy. npu 10-go6oBoMy orpyeHHi Kap6o$ocoM i Ha 4- Ta 7-My go6y ypa^eHHa CCI4 nicga yBegeHHa eHTepocregro aKTHBHicTb CM1 Ta CM2 y nenmui 3HH3ugaca b 1,8 pa3a. y HacrynHHH TepMiH gocgig^eHHa (10 gi6 ypa^eHHa Kap6o$ocoM i 7 gi6 oipyeHHa TerpaxgopMeTaHoM) aKTHBHicTb ^paKuin CM1 3HH3ugacb ygBini, CM2 - b 1,7 pa3a. nicga 30-go6oBoro yBegeHHa Kap6o$ocy Ta Ha 4-ry go6y orpyeHHa CCI4 noKa3HHK CM1 3HH3HBca b 2,6 pa3a, CM2 - b 1,6 pa3a y ^ypiB, aKi orpuMyBagu eHTepocregb nopiBHaHo 3 ypa^eHHMH ^ypaMu; Ha 30- Ta 7-My go6y yBegeHHa ToKcHKaHTiB CM1 3HH3HBca B 2,6 pa3a, CM2 -b 1,2 pa3a.
AKTHBHicTb aMiHoipaHc$epa3 y nenmui 3HH3ugaca, ^o cBigHHTb npo nopymeHHa npoueciB nepeaMiHyBaHHa Ta BKa3ye Ha uHTogi3 renaiouHriB b ypa^eHoMy opraHi3Mi 3a giï ToKcHKaHTiB. yBegeHHa cop6eHTy eHTepocregro He BHK-guKago BiporigHoro nigBH^eHHa aKTHBHocri AgAT i AcAT (Ta6g. 2). Ha KiHeub eKcnepuMeHry aKTHBHicTb gaHux eH3HMiB 3pocga Ha 6% BigHocHo piBHa ypa^eHHx ^ypiB.
Таблиця 2
Динамика бюхМчних моказнмк1в у печшщ щур1в, одночасно уражених карбофосом i тетрахлорметамом тсля корскцм ентеросгелем (M ± m)
Показник 1нтактний контроль, n = 6 Термш дослщження, доба
10 + 4 СС14 10 + 7 СС14 30 + 4 СС14 30 + 7 СС14
ураженi, n = 6 корекцiя, n = 6 ураженi, n = 6 корекцш, n = 6 уражеш, n = 6 корекцш, n = 6 ураженi, n = 6 корекц1я, n = 6
ТБК-АП, мкмоль/кг 8,65 ± 0,27 11,66 ± 0,03* 10,32 ± 0,02** 12,21 ± 0,04* 11,50 ± 0,02** 13,82 ± 0,03* 12,46 ± 0,01** 15,92 ± 0,04* 14,75 ± 0,02**
СМ1 , у. о./кг 0,46 ± 0,17 0,90 ± 0,01* 0,51 ± 0,01** 1,25 ± 0,01* 0,63 ± 0,01** 1,92 ± 0,02* 0,74 ± 0,01** 2,41 ± 0,02* 0,92 ± 0,02**
СМ2 , у. о./кг 0,48 ± 0,03 0,94 ± 0,01* 0,52 ± 0,01** 1,31 ± 0,02* 0,77 ± 0,01** 1,89 ± 0,02* 1,18 ± 0,01** 2,35 ± 0,02* 1,94 ± 0,01**
АлАТ, мкмоль / (кггод.) 2,17 ± 0,01 2,11 ± 0,01* 2,13 ± 0,01 2,01 ± 0,01* 2,07 ± 0,01** 1,99 ± 0,02* 2,06 ± 0,01** 1,88 ± 0,02* 2,02 ± 0,01**
АсАТ, мкмоль / кг год.) 3,68 ± 0,25 3,34 ± 0,21 3,52 ± 0,01 2,78 ± 0,15* 3,05 ± 0,01 2,72 ± 0,14* 2,94 ± 0,01 2,52 ± 0,14* 2,74 ± 0,01
ЛФ, ммоль/л 12,61 ± 0,37 10,72 ± 0,30* 12,16 ± 0,01** 7,83 ± 0,35* 9,22 ± 0,01** 7,32 ± 0,24* 10,12 ± 0,01** 5,76 ± 0,24* 8,17 ± 0,01**
АХЕ, мкг/хв 177,1 ± 0,32 153,0 ± 0,53* 171,3 ± 0,30** 130,7 ± 0,64* 167,3 ± 0,67** 125,2 ± 0,66* 167,6 ± 0,61** 121,5 ± 0,35* 159,3 ± 0,49**
За до токсиканпв на оргашзм тварин спостертали щдвищення активносп лужно1 фосфатази у сироватщ кров1 та зниження ïï активносп у печiнцi дослвдних щу-piB (табл. 2). При уведенш в уражений оргатзм ентерос-гелю вiдмiчено пiдвищення активносгi даного ферменту у печшщ. При 10-добовому уведент карбофосу та на 4- та 7-му добу ураження СС14 активтсть ЛФ зросла на 11,0%. Шсля 30-добового уведення карбофосу та на 4-ту добу отруення СС14 при введенш ентеросгелю активнiсть ЛФ збшьшилася на 22,0%, ввдповщно на 30- та 7-му добу введення токситв показник зрiс на 19,0% ввдносно уражених тварин. Таким чином, застосу-вання ентеросгелю зумовило нормалiзацiю даного по-казника у печiнцi уражених тварин, що свiдчить про зменшення запального процесу в даному оргаш
Ураження щурiв ксенобiотиками викликае пригшчення активносп АХЕ у печiнцi, що може слугу-
При використаннi ентеросгелю спостертаеться зменшення вмiсту ТБК-АП у мiокардi уражених тварин. При 10-добовому введенш карбофосу та на 4- i 7-му добу ураження СС14 вмют ТБК-АП знизився на 9,0%.
При 30-добовш iнтоксикацiï карбофосом та на 4-ту добу шсля ураження тетрахлорметаном даний показник знизився на 6,0%, у наступний термш дослвдження та пiсля введення ентеросгелю вмкт ТБК-АП знизився на 5,0%. 1з даних, наведених у таблиц 3, видно, що засто-
вати iндикатором для визначення ступеня ураження оргатзму фосфоорганiчними сполуками. Застосовуючи сорбент, ми спостерцали щдвищення активносп даного ферменту. При 10-добовому введенш карбофосу та на 4-ту добу ураження СС14 актившсть АХЕ шдвищилась на 11,0%. При 10-добовш iнтоксикацiï карбофосом i на 7-му добу введення тетрахлорметану показник зрк на 20,0% при застосуванш сорбенту. Пiсля 30-добового уведення карбофосу та на 4-ту добу отруення СС14 при уведент ентеросгелю активтсть данного ферменту щдвищилась на 24,0%, вщповщно на 30- та 7-му добу уведення токситв на 21,0% пор1вняно з ураженими тва-ринами, що щдгверджуе коригувальт властивостi енте-росгелю.
У ходi експерименту виявлено патологiчнi змiни в мiокардi уражених тварин: збiльшення вмiсту ТБК-АП та пригтчення активностей АлАТ i АсАТ (табл. 3).
сування сорбенту не викликало суттевого зростання активносп амшотрансфераз у мiокардi уражених щурiв. На юнець експерименту активнiсть АлАТ зросла на 2,5%, актившсть АсАТ зазнала незначних змш.
Висновки
Розвиток токсичного гепатиту, викликаного уведен-ням в оргашзм тетрахлорметану, на тлi 30-добового ура-
Таблиця3
Динамика бюхМчних показникэв у м1окард1 щур1в, одночасно уражемих карбофосом i тетрахлорметамом тсля корекцГГ ентеросгелем (M ± m)
Показник 1нтактний контроль, n = 6 Термш дослщження, доба
10 + 4 СС14 10 + 7 СС14 30 + 4 СС14 30 + 7 СС14
ураженi, n = 6 корекщя, n = 6 ураженi, n = 6 корекцш, n = 6 ураженi, n = 6 корекцш, n = 6 ураженi, n = 6 корекцш, n = 6
ТБК-АП, мкмоль/кг 11,25 ± 0,09 12,85 ± 0,02* 11,92 ± 0,02** 13,63 ± 0,11* 12,71 ± 0,02** 15,64 ± 0,05* 14,94 ± 0,01** 16,67 ± 0,06* 16,07 ± 0,02**
АлАТ, мкмоль/(кг год.) 2,11 ± 0,01 2,02 ± 0,01* 2,05 ± 0,01** 1,95 ± 0,01* 2,01 ± 0,01** 1,92 ± 0,01* 1,95 ± 0,01** 1,84 ± 0,01* 1,89 ± 0,01**
АсАТ, мкмоль/(кг год.) 3,53 ± 0,01 3,46 ± 0,01* 3,47 ± 0,01 3,39 ± 0,01* 3,41 ± 0,01** 3,26 ± 0,01* 3,30 ± 0,01** 3,18 ± 0,01* 3,22 ± 0,01**
xeHHH rnypiB Kap6o$ocoM cnprnHHKe rgH6oKi Mera6oniHm nopymeHHH. Ha цe BKa3yKTb 3MiHH BMicry TEK-An, Moge-Kyg cepegHboi Macu, aKTHBHOcreH aMiHOTpaHC$epa3, gyxHOi $oc$aTa3H Ta aцeгнgхogiнecтepaзн. 3acrocyBaHHH emepoc-regK 3yM0BHi0 npHTHineHHa пpоцeciв BigbHopagHKagbHoro OKHCHeHHH, 3HHxeHHH cryneHH eHgoreHHOi iнтoкcнкaцii opraHi3My Ta 3MeHmeHHH 3anagbHHx пpoцedв b ypaxeHHx
KceHo6ioTHKaMH rnypiB, ^o go3Bogae npoBecTH HaciynHi
gocgig^eHHH 3 BHBneHHH e^eKTHBHOCii 3acrocyBaHHH gaHO-ro cop6emy 3a yMOB xiMMHoro OTpyeHHH.
Bi6^iorpa$iHHi iIOCII. lanim
Bondarev, E.V., Shtrygol, S.Y., Dyryavyu, S.B., 2008. Prime-nenie enterosorbentov v meditsinskoy praktike [Use of en-terosorbents in medical practice]. Provizor [Pharmacist] 1314, 39-43 (in Russian). Gubskiy, Y.I., Levitsky, Y.L., Zadorin, O.V., Yanitska, L.V., Afanasenko, O.V., 2005. Biochemical and molecular mechanisms of chemical cell death by destruction highly toxic xenobiotics. Bukov. Med. Herald. 9(2), 76-77. Guide for the care and use of laboratory animals: Eighth edition,
2011. The National Academies Press, Washington, DC. Kind, J., 1954. Determination of the activity of alkaline phosphatase. J. Clin. Path. 7(4), 322-326. Kolb, V.G., Kamyshnikov, V.S., 1982. Spravochnik po klinicheskoy himii [Handbook of clinical chemistry]. Belarus, Minsk (in Russian).
Lapach, S.N., Chubenko, A.V., Babich, P.N., 2000. Statistiches-kie metody v medikobiologicheskih issledovaniyah s ispol-zovaniem Excel [Statistical methods in medical-biological researches with using of Excel]. Morion, Kiev (in Russian).
Lushchak, V.I., Bahnyukova, T.V., Lushchak, A.V., 2004. Indicators of oxidative stress. Thiobarbituric products and protein carbonyl groups. Ukr. Biochem. J. 26, 136-141 (in Ukrainian).
Nikolaichik, V.V., Kirkovski, V.V., Main, V.M., 1989. "Middle molecules" - education and methods of the determination. Lab. Delo 8, 31-33.
Reitman, S., Frankel, S., 1957. Definition of biochemical indicators of the toxicity of liver. Amer. J. Clin. Path. 28(1), 56-60.
Rybolovlev, Y.R., 1979. Dosing agents for mammalian by the constants of biological activity. Reports of AN USSR 247(6), 1513-1516.
Voronko, E.A., 2004. Acute poisoning with organophosphorous compounds. Medicine 4, 26-29.
Walewsky, S.F., Shinkarenko, N.D., Dubovsky, N.G., Borisov, I.S., 2003. To diagnose of neuropathies caused by the toxic exposure to organophosphorus compounds having a remote neurotoxicity. Modern Problems of Toxicology 2, 77-79.
Yermolayeva, E.E., Goncharov, N.V., Radilov, A.S., 2008. Esterase activity, platelet hemostasis, neuromuscular conduction and morphological changes in the modeling of chronic oral toxicity substance type Vx. Toxicol. News 3, 2-8.
Zhminko, P.G., Loboda, Y.I., 2003. Toxicity and anticholinergic effect of some organophosphorus pesticides according to their sorption on serum proteins. Modern Problems of Toxicology 1, 18-21.
Hadiumna do редкonегii 28.10.2014
