CC BY
77
Приложение
%
□ Первичная медиастинальная В-ККЛ □ Диффузная В-ККЛ с первичным вовлечением
лимфатических узлов средостения
Распределение величины экспрессии генов (1 - TRAF1, 2 - PDL1, 3 - PDL2, 4 - JAK2, 5 -MAL) в группе первичной медиастинальной В-ККЛ и диффузной В-ККЛ.
биологическим особенностям в REAL и затем в ВОЗ-классификации. Использование гистологических и иммуногистохимических методов не всегда позволяет провести дифференциальную диагностику диффузной В-ККЛ с первичным вовлечением лимфатических узлов средостения и первичной медиастинальной В-ККЛ. Предпосылкой для использования молекулярного метода в диагностике В-ККЛ с первичным вовлечением передне-верхнего средостения стал анализ экспрессии генов, который позволил выделить несколько вариантов диффузной В-ККЛ.
Материалы и методы. Молекулярное исследование выполнено 33 больным с гистологическим диагнозом первичной медиастинальной В-ККЛ. С целью формирования групп контроля были получены лимфоциты крови от 12 здоровых добровольцев, опухолевые клетки из биоптата лимфатического узла 12 больных с установленным диагнозом генерализованной формы диффузной В-ККЛ III-IV стадии (без вовлечения медиастинальных лимфатических узлов) и популяция лимфоцитов из 5 образцов нормальных лимфатических узлов. Для всех больных и доноров определяли уровень экспрессии мРНК генов JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1 методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени.
Результаты и обсуждение. В контрольной группе у больных с диагнозом диффузной В-ККЛ без вовлечения медиастинальных лимфатических узлов (п = 12) гиперэкспресиия гена JAK2 определялась в 1 (8,3%) случае, а гена TRAF1 - в 2 (16%). Уровень экспрессии генов MAL, PDL1, PDL2 был в пределах
нормы. Ни в одном случае сочетанная экспрессия исследуемых генов не выявлена. У 20 (61%) из 33 больных с первичным вовлечением средостения определялась повышенная экспрессия генов JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1, что позволило подтвердить диагноз первичной медиастинальной В-ККЛ, а именно у 16 (78%) из 20 больных выявлена гиперэкспрессия гена TRAF1, у 3 (15%) - гена PDL1, у 8 (40%) - гена PDL2, у 19 (95%) - гена JAK2, у 12 (60%) - гена MAL. Во всех случаях определялась сочетанная экспрессия двух исследуемых генов и более. У 13 (39%) из 33 больных отмечено совпадение молекулярных маркеров с контрольной группой пациентов с диагнозом диффузной В-ККЛ без вовлечения медиастинальных лимфатических узлов. При этом отсутствовала гиперэкспрессия двух исследуемых генов и более (JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1) и только у 1 (8%) больного отмечена гиперэкспрессия гена TRAF1 (см. рисунок).
Заключение. У 13 (39%) из 33 больных диагноз первичной медиастинальной В-ККЛ был пересмотрен в пользу диффузной В-ККЛ с первичным вовлечением лимфатических узлов средостения, а у 20 (61%) из 33 - подтвержден гистологический диагноз первичной медиастинальной В-ККЛ. Выявлено, что уровень экспрессии генов JAK2, MAL, TRAF1, PDL1 и PDL2 у больных первичной медиастинальной В-ККЛ по сравнению с больными диффузной В-ККЛ без поражения лимфатических узлов средостения и диффузной В-ККЛ с первичным вовлечением лимфатических узлов средостения статистически значимо выше (р = 0,05).
Частота встречаемости мутации V617F в гене JAK2 у больных миелопролиферативными заболеваниями
в Санкт-Петербурге и Ленинградской области
И.С. Мартынкевич \ Е.В. Петрова \ Л.С. Мартыненко \ М.П. Иванова \ Н.Ю. Цыбакова \ А.М. Румянцев \
В.Ю.1 Удальева, Е.В. Карягина 2, Т.В. Шнейдер 3, К.М. Абдулкадыров 1 'ФГУ Российский НИИ гематологии и трансфузиологии; 2Городская больница №15, Санкт-Петербург; Ленинградская областная больница
Введение. Открытие мутации V617F в гене JAK2 - главное достижение в понимании молекулярных механизмов патогенеза хронических миелопролиферативных заболеваний (ХМПЗ). По сообщениям различных авторов частота встречаемости данной мутации варьирует и определяется у 65-97% больных истинной полицитемией (ИП), у 32-57% - с эссенциальной тромбоцитемией (ЭТ) и у 35-57% - хроническим идиопатическим миелофиброзом (ХИМФ). Доказано также, что присутствие неблагоприятных хромосомных аберраций (комплексный кариотип, аномалии 7-й и 17-й
хромосом) у больных ХМПЗ может рассматриваться как наиболее неблагоприятный фактор низкой выживаемости таких больных. Цель исследования - определение частоты встречаемости мутации V617F в гене JAK2 и варианта кариотипа у больных ХМПЗ Санкт-Петербурга и Ленинградской области.
Материалы и методы. В исследование включены 307 больных (178 женщин и 129 мужчин) в возрасте от 38 до 67 лет (средний возраст 52 года), обследованных в гематологических центрах города Санкт-Петербурга и Ленинградской области с сентября 2007 г. по декабрь 2011 г. Из них 67 боль-
13
Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3
ных ИП, 56 -ЭТ, 44 - ХИМФ и 140 больных, обследованных с целью дифференциальной диагностики ХМПЗ с непролиферативными заболеваниями системы крови. До обследования больные не получали специфической терапии.
Результаты и обсуждение. В группе больных ИП мутация V617F в гене JAK2 определялась у 56 (83,6%) из 67 обследованных больных, при ЭТ - у 26 (46,4%) из 56, при ХИМФ - у 21 (47,7%) из 44 обследованных больных, в группе первичных обследуемых с целью дифференциальной диагностики ХМПЗ с непролиферативными заболеваниями системы крови - у 12 (8,6%) из 140. У 127 (41,4%) больных из 307 обследованных был выполнен цитогенетический анализ клеток костного мозга. У 121 (95,3%) из 127 определен нормальный кариотип, у 6 (4,7%) из 127 - клональные хромо-
сомные аберрации: у 2 - прогностически неблагоприятный комплексный кариотип, у 2 - аномалии del(13)(q22) и del(20) (q12), обуславливающие благоприятное течение заболевания, у 2 - изолированные одиночные изменения хромосом del(Y)(q12), del(3)(p13).
Заключение. Полученные в ходе нашего исследования результаты по определению частоты встречаемости мутации V617F в гене JAK2 у больных с различными вариантами ХМПЗ Санкт-Петербурга и Ленинградской области соответствуют данным литературы. Определение мутации V617F в гене JAK2 служит дополнительным диагностическим маркером у больных ХМПЗ, а выявление у них комплексного кариотипа при цитогенетическом исследовании позволяет выделить группу риска трансформации заболевания.
Болезнь Кастлемана: клинико-морфологические варианты и результаты лечения
А.Л. Меликян, Е.К. Егорова, И.Б. Капланская, А.М. Ковригина ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва
Введение. В последнее время отмечен значительный интерес к болезни Кастлемана (БК), в первую очередь, из-за ее связи с герпесвирусом 8-го типа (HHV-8), ВИЧ-инфекцией. Эта редкая болезнь с первоначальным проявлением в качестве доброкачественного заболевания, относится к неопухолевым лимфаденопатиям. БК может сочетаться с POEMS-синдромом, множественной миеломой, может прогрессировать в саркому Капоши, злокачественную лимфому или опухоль из фолликулярных дендритных клеток. Диагностика БК требует обязательного выделения гистологических подтипов болезни: гиалино-васкулярный, плазмоклеточный, смешанный; уточнения степени распространенности процесса (локальный, мультицентрический), исследования на инфицированность HHV-8, уровня продукции интерлейкина-6 (ИЛ-6). В данной работе представлены клинико-морфологическая характеристика и результаты лечения 48 ВИЧ-неинфицированных больных БК, наблюдавшихся в поликлиническом отделении Гематологического научного центра (ГНЦ) с 1995 по 2011 г.
Материалы и методы. Средний возраст больных составил 36 лет (16-69 лет). Сроки наблюдения от 7 до 320 мес, соотношение М:Ж - 1,1:1,0. Среди них у 22 (46%) диагностирован гиалино-васкулярный вариант, у 16 (33%) - плазмоклеточный вариант и у 10 (21%) - смешанный вариант БК. У 4 больных с плазмоклеточным мультицентрическим вариантом болезни (МКБ) в ткани лимфатического узла иммуногистохимическим методом выявлена ДНК HHV-8. У всех больных с плазмоклеточным вариантом, независимо от цен-тричности болезни, иммуногистохимическим методом ткани лимфатического узла выявили разной степени выраженности гиперпродукцию ИЛ-6.
Результаты и обсуждение. Анализ результатов лечения показал, что хирургическое удаление вовлеченных лимфати-
ческих узлов привело к выздоровлению у 33 (70%) больных с локальным гиалино-васкулярным и плазмоклеточным ва-риантамами БК, независимо от анатомической локализации опухоли. Среди них, 5 больных с локальным плазмоклеточным вариантом дополнительно получили лучевую терапию на область поражения (30-40 Гр). Рецидивы не наблюдались ни у одного больного при сроках наблюдения от 28 до 290 мес. Из-за редкости заболевания, лечение плазмоклеточного варианта БК представляет большие трудности. В настоящее время живы 8 (53%) из 15 больных: 2 больных получили терапию курсами CHOP (срок наблюдения от 24 до 36 мес); 2 больных аутоиммунной гемолитической анемией (АИГА) получили терапию курсами R-CHOP (ремиссия, срок наблюдения от 36 до 60 мес) и 3 - по программе ритуксимаб + велкейд + дексаметазон (ремиссия, срок наблюдения от 7 до 14 мес). Остальные 7 (47%) больных, среди них 3 больных МКБ, ассоциированным с HHV-8, со средней продолжительностью жизни 44 мес, умерли от септических осложнений. У 2 больных HHV-8 ассоциированным с плазмоклеточным вариантом, в среднем через 48 мес, констатирована трансформация заболевания в лимфому с агрессивным течением и летальным исходом. Таким образом, прогноз плазмоклеточного варианта БК неблагоприятен.
Выводы:
1. БК, несмотря на свою редкость, должна быть включена в дифференциальный диагноз лимфаденопатий.
2. Прогноз БК у ВИЧ-отрицательных больных определяется гистологическим вариантом и степенью распространенности заболевания.
3. Выбор терапии при БК зависит от гистологического варианта, распространенности процесса, наличия аутоиммунных осложнений и инфицированности HHV-8.
Эффективность комбинированной иммуносупрессивной терапии больных апластической анемией по данным многоцентрового исследования Национального гематологического общества (2005-2011 гг.)
Е.А. Михайлова 1, А.Д. Кулагин 2, Т.С. Капорская 3, Н.А. Вопилина 4, Т.С. Тикунова 5, Войцеховский В.В.6, Плоских М.А.7, Коробкин А.Д.8, Мозес А.Д.9, Чагорова Т.В.10, Константинова Т.С.11, Лапин В.А.12, Савченко В.Г.1 1 ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва; 2 Институт детской гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова;
3Областная клиническая больница, Иркутск; 4 Областная клиническая больница, Тамбов; 5Областная клиническая больница, Белгород; 6Амурская областная клиническая больница, Благовещенск; 7 Областная клиническая больница, Пермь; 8 Областная клиническая больница, Челябинск; 9 Областная клиническая больница, Кемерово; 10 Областная клиническая больница, Пенза; 11 Областная клиническая больница,
Екатеринбург; 12 Областная клиническая больница, Ярославль
Введение. В рамках Национального гематологического общества с 2005 г. проводится первое отечественное многоцентровое исследование эффективности иммуносупрессивной терапии (ИСТ) при апластической анемии (АА). Цель на-
стоящего исследования - координация усилий по оказанию доступной современной медицинской помощи больным АА.
Материалы и методы. В исследовании принимают участие 14 гематологических центров (Гематологический на-
14
