Научная статья на тему 'Бифидум-среда для выделения и культивирования бифидобактерий'

Бифидум-среда для выделения и культивирования бифидобактерий Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

CC BY
7784
583
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Инфекция и иммунитет
Scopus
ВАК
RSCI
ESCI
Ключевые слова
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ / БИФИДОБАКТЕРИИ / ВЫДЕЛЕНИЕ БИФИДОБАКТЕРИЙ / ПРОБИОТИКИ / NUTRIENT MEDIA / BIFIDOBACTERIUM / BIFIDOBACTERIA / ISOLATION OF BIFIDOBACTERIA / PROBIOTICS

Аннотация научной статьи по биотехнологиям в медицине, автор научной работы — Домотенко Любовь Викторовна, Шепелин А.П.

Проведена оценка качества сухой питательной среды для культивирования и выделения бифидобактерий (Бифидум-среда) в сравнительных испытаниях со средой Блаурокка. Показано, что Бифидум-среда поддерживает типичный рост штаммов бифидобактерий пяти основных видов: Bifidobacterium bifidum, B. breve, B. adolescentis, B. infantis, B. longum. При исследовании пробиотического препарата бифидумбактерина получены сопоставимые результаты по его эффективности и активности кислотообразования при использовании обеих сред. При анализе клинического материала (кал на дисбактериоз) средняя концентрация бифидобактерий составила 8,15 lg КОЕ/г на Бифидум-среде и 6,68 lg КОЕ/г на среде Блаурокка.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биотехнологиям в медицине , автор научной работы — Домотенко Любовь Викторовна, Шепелин А.П.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Bifidum-medium for isolation and cultivation of bifidobacteria

The comparative evaluation of Bifidum-medium quality (the nutrient medium for cultivation and selection bifidobacteria, dry) and Blaurock medium has been performed. It was shown that Bifidum-medium supports the typical growth of the main types of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum, B. breve, B. adolescentis, B. infantis, B. longum. The comparable results for the efficacy and the activity accumulation of acid were obtained in the study of probiotic «bifidumbacterin» using both media. In studies of faecal material the medium concentration of bifidobacteria was found 8.15 lg CFU/g on Bifidum-medium and 6.68 lg CFU/g on Blaurock medium.

Текст научной работы на тему «Бифидум-среда для выделения и культивирования бифидобактерий»

гомТГмоТГгТсГгбз Краткие сообщения

БИФИДУМ-СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БИФИДОБАКТЕРИЙ

Л.В. Домотенко, А.П. Шепелин

ФБУН Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Роспотребнадзора, п. Оболенск, Московская область, Россия

Резюме. Проведена оценка качества сухой питательной среды для культивирования и выделения бифидобак-терий (Бифидум-среда) в сравнительных испытаниях со средой Блаурокка. Показано, что Бифидум-среда поддерживает типичный рост штаммов бифидобактерий пяти основных видов: Bifidobacterium bifidum, B. breve, B. adolescentis, B. infantis, B. longum. При исследовании пробиотического препарата бифидумбактерина получены сопоставимые результаты по его эффективности и активности кислотообразования при использовании обеих сред. При анализе клинического материала (кал на дисбактериоз) средняя концентрация бифидобак-терий составила 8,15 lg КОЕ/г на Бифидум-среде и 6,68 lg КОЕ/г на среде Блаурокка.

Ключевые слова: питательные среды, Bifidobacterium, бифидобактерии, выделение бифидобактерий, пробиотики.

Введение

Бифидобактерии являются анаэробными, грамположительными бактериями, которые доминируют в кишечной микрофлоре здоровых людей [10]. Наличие высокого уровня бифидобактерий в кишечнике человека предполагает их весомый вклад в здоровье человека, что привело к использованию бифидобактерий как пробиотиков. Положительный эффект бифидобактерий показан при различных заболеваниях, например, диарее, связанной с ротавирусной инфекцией и некоторыми воспалительными кишечными заболеваниями, с приемом антибиотиков и др. [14]. Существует мнение о положительной роли бифидобактерий в стимулировании иммунитета [11].

Для выделения бифидобактерий из фекалий, обнаружения и подсчета их в пробиотиче-ских продуктах широко применяется культу-ральный метод с использованием питательных средах. В литературе описано значительное количество прописей питательных сред для выделения и культивирования бифидобакте-рий [8, 12]. Среди них есть агаризованные и полужидкие питательные среды, селективные и неселективные. Агаризованные питательные

среды удобны для выделения чистой культуры микроорганизма, но при их использовании для выделения бифидобактерий требуется создание анаэробных условий и происходит снижение результатов на 1—2 порядка [7]. Полужидкие среды, разлитые в стеклянные пробирки, лишены перечисленных недостатков.

Существуют селективные среды для бифидобактерий [13, 15]. Но поскольку род Bifidobacterium включает более 30 видов, отличающихся значительной гетерогенностью в отношении устойчивости к противоми-кробным препаратам и другим ингибиторам [1], сложно разработать одну среду с высокой селективностью при сохранении хорошей степени выделения. Поэтому в лабораторной практике чаще используют неселективные питательные среды.

Основной средой, нашедшей широкое применение как при выделении бифидобактерий из фекалий, так и при контроле производства бактерийных препаратов и молочнокислых продуктов, является полужидкая печеночно-цистеиновая среда Блаурокка [4, 6]. Некоторые лаборатории клинической микробиологии выделяют бифидобактерии на тиогликолевой среде [9].

Авторы:

Домотенко Л.В., к.х.н., зав. лабораторией разработки питательных сред ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора, п. Оболенск, Московская область, Россия;

Шепелин А.П., д.б.н., зам. директора по научно-производственной деятельности ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора, п. Оболенск, Московская область, Россия.

Адрес для переписки:

Домотенко Любовь Викторовна

142279, Россия, Московская область, Серпуховской район, п. Оболенск, ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора. Тел./факс: 8 (4967) 36-00-17. E-mail: domotenko@obolensk.org

поступила в редакцию 17.06.2014 принята к печати 27.06.2014

© Домотенко Л.В., Шепелин А.П., 2014

Среда Блаурокка — это среда лабораторного изготовления. Каждая лаборатория, как правило, готовит ее самостоятельно небольшими партиями, что отрицательно отражается на ее стандартности. Кроме этого, учитывая нестандартность исходного сырья — печени, которая в результате изменения окружающей среды, использования в рационе животных большого количества антибиотиков, может содержать токсичные вещества, в связи с чем становится актуальным применение коммерческих сухих питательных сред, отличающихся своей стандартностью.

В ФБУН ГНЦПМБ разработана сухая неселективная питательная среда, предназначенная для выделения и культивирования бифидобак-терий — Бифидум-среда, налажен ее промышленный выпуск. В ряде публикаций описано применение Бифидум-среды для научных и диагностических целей [2, 3]. Целью настоящей работы явилась оценка свойств Бифидум-среды при работе с музейными штаммами бифидо-бактерий, клиническим материалом и анализе пробиотиков.

Материалы и методы

Для контроля качества питательных сред использовали тест-штаммы B. bifidum АТСС 11863, B. breve АТСС 15701, B. adolescentis АТСС 15706, B. infantis АТСС 15702, B. longum АТСС 15708, Escherichia coli 3912/41 (O55:K59), Pseudomonas aeruginosa 27/99, Proteus vulgaris HX 19222, Enterobacter aerogenes NCTC 10006, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Lactobacillus delbrueckii ATCC 11842, Staphylococcus aureus Wood-46, полученные из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ГКПМ-Оболенск, а также клинические штаммы Bifidobacterium и производственные штаммы B. bifidum.

Штаммы хранили в лиофилизированном состоянии при температуре не выше 4—8°С. Перед использованием их суспензировали в стерильном 0,9 % растворе хлорида натрия и субкульти-вировали на среде Блаурокка в течение 20—24 ч при температуре 37±1°C, после чего готовили микробную взвесь каждого штамма по отраслевому стандартному образцу мутности ОСО 42-28-86П. Полученные суспензии каждого тест-штамма десятикратными разведениями доводили до разведения 10-8. Посев в питательные среды, разлитые по 9 мл в стеклянные бактериологические пробирки, производили по 1 мл. Учет результатов проводили не позднее 48 ч инкубации при температуре 37±1°С визуально по наличию типичных колоний бифидобактерий.

В качестве контрольной среды использовали среду Блаурокка лабораторного приготовления.

Качество питательных сред оценивали в соответствии с требованиями МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических пи-

тательных сред». Активность кислотообразо-вания штаммов бифидобактерий определяли титриметрическим методом по ФС 42-3947-00 на бифидумбактерин, сухой при культивировании в опытной и контрольной средах. Кислотность выражали в градусах Тернера (°Т) и вычисляли по формуле:

°Т = А х К х 10, где

А — количество миллилитров 0,1 М раствора натрия гидроксида, пошедшее на титрование 10 мл микробной суспензии; К — поправка к титру 0,1 М раствора натрия ги-дроксида;

°Т — условная величина, выраженная в градусах Тернера.

Результаты и обсуждение

Оценку свойств Бифидум-среды проводили в три этапа. На первом этапе исследования изучали биологические свойства Бифидум-среды с использованием музейных штаммов бифидобактерий. На втором этапе Бифидум-среду испытывали при контроле бактерийных препаратов. Третий этап включал исследование клинического материала.

Первый этап исследований Бифидум-среды проведен с использованием 21 штамма Bifido-bacterium пяти видов. Свойства Бифидум-среды оценивали по наибольшему разведению лиофилизированных штаммов бифидобакте-рий, при котором наблюдался их типичный рост через 48 ч инкубирования, а затем при втором пассаже — по интенсивности нарастания микробной массы штаммов (эффективности) через 24 ч инкубации. Сравнительные результаты исследований представлены в табл. 1. Отмечены хорошие ростовые свойства Бифидум-среды, не уступающие среде Блау-рокка и позволяющие активно размножаться бифидобактериям.

Представленные в табл. 1 данные согласуются с результатами культивирования на Бифи-дум-среде новых запатентованных 7 штаммов B. bifidum, 5 штаммов B. longum и 3 штаммов B. adolescentis, предназначенных для получения бифидосодержащей продукции [5]. Показано, что все 15 штаммов активно наращивают микробную массу с высокой концентрацией би-фидобактерий (8—9 lg КОЕ/мл) и высокой кислотообразующей активностью при росте как на гидролизатно-молочной питательной среде, так и Бифидум-среде.

Активность кислотообразования, то есть способность штаммов бифидобактерий накапливать кислоты в процессе культивирования, является одним из основных показателей качества производственных штаммов бифидо-бактерий и препаратов, приготовленных с их использованием. Проведенные эксперименты

продемонстрировали влияние качества питательной среды на интенсивность проявления кислотообразующей способности пяти штаммов бифидобактерий (табл. 2). Как видно из таблицы показатель активности кислото-образования исследованных штаммов оказался значительно ниже на тиогликолевой среде, чем на Бифидум-среде и среде Блаурокка.

Поскольку Бифидум-среда может быть использована при подготовке производственных штаммов, дальнейшие исследования были посвящены проверке сохранения биологических характеристик тест-штаммов бифидобактерий при многократных пассажах на данной среде. Как показали результаты проведенных исследований, свойства бифидобактерий не изменялись на протяжении пяти пассажей на данной среде. Все тест-штаммы вырастали из разведения 10-7 через 24—48 ч инкубации при температуре 37±1°С в виде единичных колоний типа «зерен», «крошек», «тяжей», «комет». Клетки тест-штаммов сохраняли свою типичную морфологию: прямые или слегка изогнутые, с булавовидными утолщениями на конце, иногда ветвящиеся и образующие цепочки.

На втором этапе исследований Бифидум-среду использовали для определения концентрации бифидобактерий в пробиотическом препарате «Бифидумбактерин» различных фирм-изготовителей и различных форм выпуска (в порошке или в таблетках). При исследовании четырех коммерческих препаратов «Бифидумбактерина» получены сопоставимые результаты по КОЕ (колониеобразующие единицы) и активности кислотообразования и на Бифидум-среде, и среде Блаурокка независимо от формы выпуска препарата (табл. 3).

Дальнейшие исследования были посвящены клиническим испытаниям Бифидум-среды. Бифидум-среду использовали при проведении исследований на дисбактериоз проб фекалий, полученных от 28 пациентов, среди которых были 19 новорожденных, 7 детей в возрасте от 1,5 до 2 лет и двух взрослых (16 и 60 лет). Как показали результаты исследований, в материале от 9 новорожденных через 24 ч инкубации роста бифидобактерий не было обнаружено ни в Бифидум-среде, ни в контрольной среде Блаурокка. Через 48 ч инкубирования рост бифидобактерий отмечен на обеих средах. У 13 пациентов концентрация бифидобактерий на Бифидум-среде была на 1—2 порядка выше, чем на контрольной среде. Содержание бифидо-бактерий в группе обследованных лиц составило 8,15 КОЕ/г при посеве фекалий в Бифидум-среду и 6,68 КОЕ/г при посеве в контрольную среду. Характерный рост бифидобактерий в виде «комет» наблюдался только в 5 пробах. В остальных случаях обнаруживалось равномерное помутнение сред. Микроскопическое

ТАБЛИЦА 1. РЕЗУЛЬТАТЫ ИСПЫТАНИЙ БИФИДУМ-СРЕДЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ

Вид Штамм Чувствительность/ эффективность (КОЕ/мл)

Бифидум-среда Среда Блаурокка

B. bifidum 1 10-7/8 х 108 10-7/1 х 109

ЛВА-3 10-7/3 х 108 108/3 х 108

791 108/4 х 108 108/2 х 109

АТСС 11863 10-7/1 х 108 10-7/1 х 108

B. longum В 379 М 10-8/2 х 108 108/6 х 109

МС-42 10-7/2 х 108 108/2 х 108

АТСС 15708 10-7/1 х 108 10-7/2 х 108

B. adolescentis ГО-13 108/4 х 108 108/7 х 108

Г 751 3 10-8/5 х 107 109/5 х 108

АТСС 15706 10-7/2 х 108 10-7/1 х 108

B. breve 79-119 10-8/2 х 109 108/3 х 109

АТСС 15701 10-7/3 х 108 10-7/2 х 108

B. infantis 73-15 10-7/3 х 108 10-6/5 х 108

79-43 10-8/1 х 108 10-6/5 х 108

АТСС 15702 10-7/2 х 108 10-7/2 х 108

исследование этих проб подтверждало наличие в них наличие бифидобактерий.

Поскольку Бифидум-среда не является селективной средой, многие микроорганизмы могут расти на ней. Однако характер роста их различен. Так, энтерококки и лактобациллы растут на среде аналогично бифидобактериям: в виде «тяжей», «комет». При культивировании E. coli и E. aerogenes происходит диффузное помутнение среды с газообразованием. S. aureus растет в виде диффузного помутнения в верхней части столбика среды с отрастающими вниз отдельно расположенными колониями в виде

ТАБЛИЦА 2. АКТИВНОСТЬ КИСЛОТООБРАЗОВАНИЯ ШТАММОВ БИФИДОБАКТЕРИЙ НА РАЗЛИЧНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ, °Т

Штамм Бифидум-среда Среда Блаурокка Тиогликолевая среда

B. bifidum АТСС 11863 90±5 89±5 45±6

B. longum АТСС 15708 100±9 105±6 35±5

B. adolescentis АТСС 15706 100±8 102±13 38±4

B. breve АТСС 15701 106±12 108±9 53±9

B. infantis АТСС15702 105±5 100±8 39±5

ТАБЛИЦА 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЕ И АКТИВНОСТИ КИСЛОТООБРАЗОВАНИЯ БИФИДУМБАКТЕРИНА НА РАЗЛИЧНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ

Называние препарата, форма, серия,срок годности Фирма-производитель Бифидум-среда Среда Блаурокка

КОЕ Активность кислото-образования,°Т КОЕ Активность кислото-образования, °Т

Бифидумбактерин, порошок, серия 272-31013, годен до 11.14 ЗАО «Партнер» 3 х 109/ 5 доз 150 3 х 109/ 5 доз 115

Бифидумбактерин порошок, серия 225-2091, годен до 10.14 ЗАО «Партнер» 2 х 109/ 5 доз 145 3 х 109/ 5 доз 120

Бифидумбактерин лиофилизат, серия 362, годен до 01.15 ЗАО «Экополис» 2 х 109/ 5 доз 159 1 х 109/ 5 доз 120

Бифидумбактерин 1000, таблетки, серия 11001, от 10.2013 ООО «Экко плюс» 2 х 105/ таблетка 59 2 х 105/ таблетка 60

«гвоздиков». В процессе роста P. vulgaris наблюдается диффузное помутнение среды. Штамм P. aeruginosa 27/99 растет на Бифидум-среде в виде диффузного помутнения в верхней части столбика среды (рис., II обложка). Поэтому использование неселективных питательных сред, включая среду Блаурокка и Бифидум-среду, при анализе клинического материала предусматривает проведение обязательной бактериоскопии посевов. При просмотре мазков, окрашенных по Граму, учитывают разведение, при котором в мазке выявляются грамположи-тельные палочки с типичной морфологией би-фидобактерий.

Таким образом, проведенные исследования продемонстрировали, что Бифидум-среда может быть успешно применена и при изучении штаммов бифидобактерий, и при анализе пробиотических препаратов, и при анализе фекалий. Причем, сравнение Бифидум-среды с широко используемой печеночной средой Блаурокка не только не выявило различий в ростовых свойствах питательных сред, но и в ряде случаев обнаружило некоторые преимущества. Проведенные испытания показали возможность замены печеночной среды на коммерческую Бифидум-среду, которая выпускается в сухом виде и имеет длительный срок хранения.

Russian Journal of Infection and Immunity = Infektsiya i immunitet , _ __ __ _ __ ..

2014, vol. 4,no. 3, pp. 279-283 У У SHORT COMMUNICATIONS

Received 17.06.2014 Accepted 27.06.2014

BIFIDUM-MEDIUM FOR ISOLATION AND CULTIVATION OF BIFIDOBACTERIA

Domotenko L.V., Shepelin A.P.

State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology, Obolensk, Moscow Region, Russian Federation

Abstract. The comparative evaluation of Bifidum-medium quality (the nutrient medium for cultivation and selection bifidobacteria, dry) and Blaurock medium has been performed. It was shown that Bifidum-medium supports the typical growth of the main types of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum, B. breve, B. adolescentis, B. infantis, B. longum. The comparable results for the efficacy and the activity accumulation of acid were obtained in the study of probiotic «bifi-dumbacterin» using both media. In studies of faecal material the medium concentration of bifidobacteria was found 8.15 lg CFU/g on Bifidum-medium and 6.68 lg CFU/g on Blaurock medium.

Key words: nutrient media, Bifidobacterium, bifidobacteria, isolation of bifidobacteria, probiotics. Authors:

Domotenko L.V.EI, PhD (Chemistry), Head of Nutrient Media Laboratory, State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology; 142279, Russian Federation, Moscow region, Obolensk; Phone/fax: 8 (4967) 36-00-17. E-mail: domotenko@obolensk.org

Shepelin A.P., PhD, MD, Deputy Director, State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology, Obolensk, Moscow region, Russian Federation.

Список литературы/References

1. Дармов И.В., Чичерин И.Ю., Погорельский И.П., Лундовских И.А., Тетерина И.С. Экспериментальное изучение чувствительности микроорганизмов пробиотиков к антибактериальным препаратам. Экспер. и клин. гастроэнтерология. 2011. № 9. С. 102-107. [Darmov I.V., Chicherin I.Yu., Pogorel'skiy I.P., Lundovskikh I.A., Teterina I.S. Eksperimental'noe izuchenie chuvstvitel'nosti mikroorganizmov probiotikov k antibakterial'nym preparatam [Experimental study of the sensitivity for probiotics microorganisms to antibiotics]. Eksper. i klin. gastroenterologiya = Experimental and Clinical Gastroenterology, 2011, no. 9, pp. 102—107.].

2. Маградзе Е.И., Шубина И.В., Семакина С.А., Марков В.Н. Зависимость динамики роста бактерий вида Escherichia coli от параметров предварительного совместного культивирования с бактериями вида Bifidobacterium bifidum // Вестник Удмуртского университета. 2005. № 10. С. 57-64. [Magradze E.I., Shubina I.V., Semakina S.A., Markov V.N. Zavisimost' dinamiki rosta bakteriy vida Escherichia coli ot parametrov predvaritel'nogo sovmestnogo kul'tivirovaniya s bakteriyami vida Bifidobacterium bifidum [Dependence of the growth dynamics of Escherichia coli on the parameters of the prior co-culture with Bifidobacterium bifidum]. Vestnik Udmurtskogo universiteta = Bulletin of Udmurt University, 2005, no. 10, pp. 57—64.].

3. Метод определения бифидобактерий в пищевых продуктах. МЗ Республики Беларусь. Рег. № 071-0210. Введен 19 марта 2010 г. [Metod opredeleniya bifidobakteriy vpishchevykh produktakh. MZRespubliki Belarus'[ Method for determination of the bifidobacteria in foods. Ministry of Health of the Republic of Belarus]. Reg. # 071-0210, Introduced in March 19, 2010.

4. Определение количества бифидобактерий в кисломолочных продуктах // Методические указания. МУК 4.2.999-00. М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2000. 13 с. [Opredelenie kolichestva bifidobakteriy v kislo-molochnykh produktakh // Metodicheskie ukazaniya. MUK 4.2.999-00 [Determination of the bifidobacteria number in dairy products. Methodological guidance. MUK 4.2.999-00]. Moscow: Federal Center for Sanitary Inspection Ministry of Health of RF, 2000, 13 p.].

5. Патент РФ №№ 2427626, 2427627, 2427628, 2427629, 2427630, 2427631, 2427632, 2427633, 2427634, 2427635, 2427636, 2427637, 2427638, 2427639, 2427640. Штамм Bifidobacterium bifidum, используемый для получения бифидосодержащей продукции: 2010. Опубл. 27.08.2011, Бюл. № 24. [Htamm Bifidobacterium bifidum, ispol'zuemyy dlya polucheniya bifidosod-erzhashcheyproduktsii: 2010. [Strain of Bifidobacterium bifidum, used for bifidoproduction: 2010]. RF Patent ## 2427626, 2427627, 2427628, 2427629, 2427630, 2427631, 2427632, 2427633, 2427634, 2427635, 2427636, 2427637, 2427638, 2427639, 2427640. Publ. 27.08.2011, Bull. no. 24.].

6. Продукты кисломолочные, обогащенные бифидобактериями бифидум. Технические условия: ГОСТ Р 52687-2006. Введ. 27.12.2006. М.: Стандартинформ, 2007. 43 с. [Produkty kislomolochnye, obogashchennye bifidobakteriyami bifidum. Tekhnicheskie usloviya: GOSTR 52687-2006. Vved. 27.12.2006. [Fermented milk products enriched with bifidobacterium bifidum. Technical conditions: GOST R 52687-2006, Enter. 27.12.2006]. M.: Standartinform, 2007, 43 p.].

7. Совершенствование методов диагностики дисбактериоза толстого кишечника // Информационное письмо. СПб., 2002. 31 с. [Sovershenstvovanie metodov diagnostiki disbakterioza tolstogo kishechnika [Improvement of diagnostic methods of colon dysbiosis]. Newsletter, St. Petersburg, 2002, 31 p.].

8. Терновская Л.Н., Калинина Т.Э., Суханова С.М., Гапон М.Н. Питательная среда для выделения и культивирования бифидобактерий // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2011. № 6. С. 124-125. [Ternovs-kaya L.N., Kalinina T.E., Sukhanova S.M., Gapon M.N. Pitatel'naya sreda dlya vydeleniya i kul'tivirovaniya bifidobakteriy [Medium for isolation and cultivation bifidobacteria]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii = Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 2011, no. 6, pp. 124—125.].

9. Юринова Г.В., Попкова С.М., Немченко У.М., Андрухова В.Я., Серых Т.А., Иванова Е.И. Качественная характеристика бифидосодержащих продуктов функционального питания на молочной основе как корректоров микроэкологических нарушений // Современные наукоемкие технологии. 2010. № 10. С. 32. [Yurinova G.V., Popkova S.M., Nemchenko U.M., Andrukhova V.Ya., Serykh T.A., Ivanova E.I. Kachestvennaya kharakteristika bifidosoderzhashchikh produktov funktsional'nogo pitaniya na molochnoy osnove kak korrektorov mikroekologicheskikh narusheniy [Qualitative characteristic of the bifidocon-taining products for the functional food based on milk as proofreaders of micro ecological violations]. Sovremennye naukoemkie tekhnologii = Modern High Technologies, 2010, no. 10, p. 32.].

10. Biavati B., Vescovo M., Torriani S., Bottazzi V. Bifidobacteria: history, ecology, physiology and applications. Ann. Microbiol., 2000, vol. 50, pp. 117-131.

11. Menard O., Butel M.-J., Gaboriau-Routhiau V., Waligora-Dupriet A.-J. Gnotobiotic mouse immune response induced by Bifidobacterium sp. strains isolated from infants. Appl. Environ. Microbiol., 2008, vol. 74, pp. 660-666.

12. Methods for the official control of probiotics used as feed additives, final report SMT4-CT98-2235, vol. 2. Luxembourg: Office for Official Publications of the European Communities, 2002, 157p.

13. Nebra Y., Blanch A.R. A New Selective Medium for Bifidobacterium spp. Appl. Environ. Microbiol, 1999, vol. 65, pp. 5173-5176.

14. Picard C., Fioramonti J., Francois A., Robinson T., Neant F., Matuchansky C. Review article: bifidobacteria as probiotic agents — physiological effects and clinical benefits. Aliment. Pharmacol. Ther., 2005, vol. 22, pp. 495-512.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

15. Tharmaraj N. Selective enumeration of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus, bifidobacteria, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, and propionibacteria. J. Dairy Sci., 2003, vol. 86, pp. 2288-2296.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.