CC BY
117
ISSN 2304-9081
Учредители: Уральское отделение РАН Оренбургский научный центр УрО РАН
Бюллетень Оренбургского научного центра
УрО РАН
2015 * № 2
Электронный журнал On-line версия журнала на сайте http://www.elmag.uran.ru
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 © Н.Е. Щепитова, М.В. Сычёва, 2015
УДК 619:579.861
1 12 Н.Е. Щепитова , М.В. Сычёва ,
АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ФЕКАЛЬНЫХ ИЗОЛЯТОВ ЭНТЕРОКОККОВ
1 Оренбургский государственный аграрный университет, Оренбург, Россия
2 Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, Оренбург, Россия
Цель. Изучение антибиотикорезистентности фекальных изолятов энтерококков, выделенных от животных, на уровне фено- и генотипа.
Материалы и методы. Штаммы Enterococcus sp. были выделены из фекалий клинически здоровых животных. Определение чувствительности энтерококков к антибиотикам проводилось диско-диффузионным методом. Генетические детерминанты антибиотикорезистентности выявляли при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Результаты. В популяции фекальных изолятов энтерококков на фенотипическом уровне распространена резистентность к фторхинолонам и линезолиду; наибольшую чувствительность штаммы сохраняли к ванкомицину, ампициллину и аминогликозидам. Для изученных бактерий рода Enterococcus характерно наличие генетических детерминант резистентности к аминогликозидам и гликопептидам при отсутствии их экспрессии.
Заключение. Охарактеризован спектр антибиотикорезистентности фекальных изолятов Enterococcus sp., выделенных от животных.
Ключевые слова: Enterococcus sp., видовой состав, антибиотикорезистентность, животные, полимеразная цепная реакция.
N.E. Shchepitova 1, M.V. Sycheva1,2
ANTIBIOTIC RESISTANCE OF FAECAL ENTEROCOCCI ISOLATES
1 Orenburg State Agrarian University, Orenburg, Russia
2
Institute of cellular and intracellular symbiosis UrB RAS, Orenburg, Russia
Aim. The study of antibiotic resistance of faecal enterococci isolates from animals, at the level of pheno- and genotype.
Materials and methods. Strains of Enterococcus sp. were isolated from the feces of clinically healthy animals. Determination of enterococci sensitivity to antibiotics was performed using a disk diffusion assay. Genetic determinants of antibiotic were detected by using a polymerase chain reaction (PCR).
Results. In populations of fecal isolates of enterococci at the phenotypic level is widespread resistance to fluoroquinolones and linezolid; most sensitive strains were maintained to vancomycin, ampicillin and aminoglycosides. For the studied bacteria of the genus Enterococcus is characterized by the presence of genetic determinants of resistance to aminoglycosides and glycopeptides in the absence of their expression.
Conclusion. Characterized by a spectrum of antibiotic resistance of faecal isolates of Enterococcus sp., extracted from animals.
Key words: Enterococcus sp., species composition, antibiotic resistance, animals, polymerase chain reaction.
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2
Введение
Известно, что интенсивное использование антибиотиков в медицине и ветеринарии способствует возникновению и широкому распространению механизмов антибиотикорезистентности у бактерий [1, 2], причём антимикробные препараты оказывают селективное давление не только на патогенные микроорганизмы, но и на симбиотические бактерии желудочно-кишечного тракта человека и животных, в том числе энтерококки. Доказано, что резистентные к антимикробным препаратам энтерококки могут передаваться человеку от домашних животных в результате тесного контакта [3], а также при употреблении в пищу контаминированных продуктов животного происхождения [4]. Энтерококки, в свою очередь, могут передавать гены устойчивости другим бактериям [5].
Данные о распространённости антибиотикорезистентности среди штаммов ЕМвтососсш Бр., выделенных от животных на территории Российской Федерации, немногочисленны [6]. Между тем исследования, направленные на изучение устойчивости к антимикробным препаратам фекальных энтерококков, необходимы для оценки их значения как резервуара генов резистентности.
В связи с вышеизложенным целью данной работы явилось изучение антибиотикорезистентности фекальных изолятов энтерококков, выделенных от животных, на уровне фено- и генотипа.
Материалы и методы
В работе были изучены 162 культуры бактерий рода ЕМвтососсш, выделенные из фекалий клинически здоровых сельскохозяйственных животных. Микроорганизмы выделяли с использованием классических бактериологических методик. Посев исследуемого материала осуществляли на жёлч-но-эскулиновый агар с азидом натрия (HiMedia, Индия). Штаммы энтерококков идентифицировали до вида при помощи мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) по наличию видоспецифических генов, кодирующих синтез супероксиддисмутазы [7].
Чувствительность микроорганизмов к антибактериальным препаратам (АБП) определяли диско-диффузионным методом [8]. Интерпретацию осуществляли на основании сопоставления результатов исследования (диаметра зоны ингибирования роста) с пограничными значениями этих параметров,
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 отделяющих чувствительные штаммы от промежуточных и промежуточные от устойчивых.
При помощи ПЦР-анализа у фекальных изолятов энтерококков определяли гены, кодирующие резистентность к аминогликозидам [9], тетрацикли-нам [10] и гликопептидам [11]: высокий уровень резистентности к гентами-цину - аас(6')-1е-арИ(2")-1а, резистентность к аминогликозидам (кроме ген-тамицина) - арЩ3')-Ша, ап1(4')-1а; резистентность к тетрациклину - ШЬ, резистентность к тетрациклину и миноциклину - tetM; резистентность к ванко-мицину и тейкопланину - уапЛ, резистентность к различным концентрациям ванкомицина - уапБ, резистентность к низким концентрациям ванкомицина -уапС-1, уапС-2/3.
Полученные при исследовании данные обработаны статистически [12].
Результаты и обсуждение
В результате идентификации, проведенной с помощью мультиплексной ПЦР, 45 штаммов были отнесены к виду Е. faecium, 39 штаммов - к виду Е. Ыгае, 36 изолятов - к виду Е. durans, 21 культура - к виду Е. faecalis, 15 штаммов - к виду Е. flavescens и 6 изолятов - к виду Е. casseliflavus.
По данным определения чувствительности энтерококков к антибактериальным препаратам диско-диффузионным методом установлено, что среди культур Е^егот^ш faecium выраженной резистентностью к энрофлоксаци-ну характеризовались 80,0±6,0% штаммов, к ципрофлоксацину - 60,0±7,3% изолятов, к норфлоксацину - 40,0±7,3% культур. В одинаковом проценте случаев штаммы сохраняли чувствительность к ципрофлоксацину и нор-флоксацину (13,3±5,1%). Более половины выделенных культур Е. faecium обладали умеренной резистентностью к линезолиду (53,3±7,4%) и цефтриаксо-ну (66,7±7,0%). У 20,0±6,0% изолятов Е. faecium обнаружена резистентность к линезолиду, у 26,7±6,6% - к цефтриаксону. К ампициллину, ванкомицину и тетрациклину культуры Е. faecium были чувствительны в 73,3±6,6, 80,0±6,0 и 86,4±5,1% случаев, соответственно. Резистентность к ампициллину определена у 26,7±6,6% изолятов. Ванкомицинрезистентные штаммы Е. faecium не были выявлены. Уровень чувствительности фекальных штаммов Е. faecium к аминогликозидам варьировал в пределах от 93,4±3,7% (к стрептомицину) до 100,0% (к гентамицину) (рис. 1).
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
□ Чувствительный И Умеренно-резистентный ■ Резистентный
Рис. 1. Чувствительность фекальных изолятов E. faecium к антибактериальным препаратам.
Аминогликозиды обладали антимикробной активностью в отношении всех изученных культур E. hirae (рис. 2). Наибольший процент резистентных
штаммов Enterococcus hirae выявлен к линезолиду (92,3±4,3%).
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
□ Чувствительный И Умеренно-резистентный ■ Резистентный
Рис. 2. Чувствительность фекальных изолятов Е. Ыгав к антибактериальным препаратам.
Распространённость резистентности к норфлоксацину, ципрофлокса-цину и энрофлоксацину среди культур Е. Ыгав составила 23,0±6,7, 38,5±7,8 и
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 46,2±8,0%, соответственно. В отношении норфлоксацина изоляты Е. Ыте сохраняли чувствительность в 38,5±7,8% случаев, в отношении энрофлокса-цина - в 7,6±4,3% случаев. Штаммы Е. Ыгае, резистентные к цефтриаксону, обнаружены в 30,8±7,4% случаев, 69,2±7,4% штаммов проявляли умеренную резистентность к данному АБП. К тетрациклину были чувствительны 61,5±7,8% культур Е. Ыгае, резистентны - 15,5±5,8%. Одинаковый процент чувствительных изолятов Е. Ытае отмечен к ванкомицину и ампициллину -92,3±4,3%. В 7,7±4,3% случаев штаммы проявляли умеренную резистентность к ванкомицину и резистентность к ампициллину.
Спектр чувствительности к антибактериальным препаратам культур Еп-terococcus durans характеризовался следующими особенностями: все штаммы обладали чувствительностью к ванкомицину и ампициллину, в 83,3±6,2% случаев - к аминогликозидам (стрептомицин, гентамицин) (рис. 3).
%
П Чувствительный П Умеренно-резистентный ■ Резистентный
Рис. 3. Чувствительность фекальных изолятов Е. durans к антибактериальным препаратам.
Умеренной резистентностью к аминогликозидам изоляты Е. durans характеризовались в 16,7±6,2% случаев. У 50,0±8,3% культур Е. durans зарегистрирована резистентность к энрофлоксацину и цефтриаксону, у 25,0±7,2% штаммов - к ципрофлоксацину и тетрациклину. Умеренную резистентность к фторхинолонам и линезолиду проявляли 33,3±7,9% культур. Процент лине-золидрезистентных изолятов Е. durans составил 58,4±8,2%. В 8,3±4,6% случаев отмечена резистентность штаммов Е. durans к норфлоксацину. Чувстви-
5
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 тельность культур E. durans в отношении тетрациклина выявлена в 66,7±7,9% случаев, а в отношении цефтриаксона - в 33,3±7,9%.
Среди штаммов Enterococcus faecalis все исследуемые культуры были чувствительны к ампициллину, тетрациклину, стрептомицину и гентамицину (рис. 4).
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
П Чувствительный И Умеренно-резистентный ■ Резистентный
Рис. 4. Чувствительность фекальных изолятов Е. faвcalis к антибактериальным препаратам.
Доля ванкомицинчувствительных изолятов Е. faвcalis составила 71,4±9,9%, тогда как ванкомицинрезистентные штаммы не были обнаружены. Высокий процент резистентных штаммов Е. faвcalis отмечен к фторхино-лонам: к норфлоксацину нечувствительны оказались 57,1±10,8% изолятов, к ципрофлоксацину - 71,4±9,9% культур, к энрофлоксацину - 85,7±7,6% штаммов. Среди фторхинолонов антимикробную активность в отношении 28,6±9,9% культур Е. faвcalis проявлял норфлоксацин. Чувствительность фекальных энтерококков к линезолиду и цефтриаксону отмечена в 57,1±10,8 и 42,9±10,8% случаев, умеренная резистентность - в 14,3±7,6 и 57,1±10,8% случаев, соответственно.
В результате исследования антибиотикорезистентности штаммов ЕМв-flavвscвns выявлена одинаковая доля (80,0±10,3%) культур, резистентных к ципрофлоксацину, энрофлоксацину и линезолиду. Количество норфлоксацинрезистентных штаммов Е. flavвscвns составило 60,0±12,6%. Большая часть (80,0±10,3%) изолятов не проявляла резистентность к ампи-
2
I
I
£
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 циллину и тетрациклину. Промежуточная резистентность культур E. flavescens к фторхинолонам, тетрациклину и линезолиду определена в 20,0±10,3% случаев. Устойчивость штаммов E. flavescens к ванкомицину и аминогликози-дам не обнаружена, тогда как в отношении цефтриаксона все исследуемые
культуры E. flavescens оказались умеренно-резистентны (рис. 5).
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
+ 1 1 1 i i
1 1
1 i i
«Г
#
/ /
/ / f ■ ^ ^ ^
/
¿ -¡г & **
/ Ж Ж # £
& / # # / ✓ / /
d*
П Чувствительный И Умеренно-резистентный
I Резистентный
Рис. 5. Чувствительность фекальных изолятов Е. Ааув8-евт к антибактериальным препаратам.
Распространённость резистентности к ванкомицину, ампициллину, фторхинолонам и линезолиду среди изолятов ЕМвгвевееш еаззвНАауш составила 50,0±20,4% (рис. 6).
Половина исследуемых штаммов Е. еаззвНАауш обладала промежуточным уровнем резистентности к ванкомицину, ципрофлоксацину, энрофлок-сацину и линезолиду. Все культуры Е. еаззвНАауш сохраняли чувствительность к тетрациклину и аминогликозидам и проявляли умеренную резистентность в отношении цефтриаксона.
В ходе исследований установлено, что полирезистентностью к антибактериальным препаратам - АБП (к трём и более классам АБП) обладали 20,0±6,0% культур Е. faвеium, 30,7±7,4% штаммов Е. Ыгав, 33,3±7,9% изолятов Е. durans. Среди культур Е. ^аувзевт и Е. еаззвНАауш процент полирезистентных штаммов составил 20,0±10,3 и 50,0±20,4%, соответственно. Полирезистентных культур Е. fавеalis выявлено не было.
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
«Г
&
ж .<г
Ж
# #
/ / / / / * / / / ^ у /
□ Чувствительный П Умеренно-резистентный
I Резистентный
Рис. 6. Чувствительность фекальных изолятов Е. casseliflavus к антибактериальным препаратам.
Таким образом, резистентность к ампициллину в 3,5 раза чаще распространена среди штаммов Е. faecium, чем Е. Ытв (р<0,05). Количество цеф-триаксонрезистентных культур Е. durans в три раза превышало число таковых среди штаммов Е. faecium (р<0,05). Все фторхинолоны были менее активны в отношении изолятов Е. faecium по сравнению с культурами Е. Ыте и Е. durans (р<0,01). Резистентность к линезолиду в большей степени распространена среди культур Е. Ыте, Е. durans и Е. flavescens, чем среди штаммов Е. faecium и Е. faecalis (р<0,001).
В популяции фекальных изолятов энтерококков, выделенных от животных, обнаружен низкий процент ванкомицинрезистентных штаммов (1,9±1,1%). На фенотипическом уровне выявлена широкая распространённость резистентности культур энтерококков к фторхинолонам (к ципрофлок-сацину - 50,0±3,9%, норфлоксацину - 33,3±3,7%, энрофлоксацину -64,9±3,75%) и линезолиду (53,8±3,9%). Максимальную чувствительность изоляты Enterococcus Бр. проявляли в отношении ампициллина - 87,0±2,6%, стрептомицина - 94,5±1,8% и гентамицина - 96,3±1,5%.
Поскольку на фенотипическом уровне не всегда проявляется информация, закодированная в геноме, на следующем этапе работы была изучена распространённость генов, кодирующих антибиотикорезистентность, среди фекальных культур энтерококков.
При исследовании фекальных изолятов энтерококков на наличие генов
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 резистентности к аминогликозидам ген aac(6,)-Ie-aph(2")-Ia, кодирующий высокий уровень резистентности к гентамицину, был выявлен у культур Е. faecium, Е. hirae, Е. durans и Е. faecalis (рис. 7).
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
ГЙ
о а а
I
£
к а
Гены резистентности к аминогликозидам
п
Гены резистентности к тетрациклинам
1А §
сц
к §
11
1
■
1
1 п а
и
к а
и
к а
Гены резистентности к гликопептидам
UE.faecium НЕ. hirae \HE.durans ШE.faecalis ШЕ. flavescens НЕ. casseliflavus
Примечание: гены кодируют резистентность к: aac(6')-Ie-aph(2")-Ia - высоким уровням гентамицина, ар^3')-Ша и ап^4')-^ - аминогликозидам (кроме гентамицина), tetM — тетрациклину и миноциклину, tetL — тетрациклину, vanA — ванкомицину и тейко-планину, vanB - различным концентрациям ванкомицина, vanC-1и vanC2/3 — низким концентрациям ванкомицина.
Рис. 7. Генетическая характеристика антибиотикорезистентности фекальных изолятов Enterococcus Бр.
У штаммов Е. durans ген aac(6,)-Ie-aph(2")-Ia регистрировали достоверно чаще (75,0±7,2%), по сравнению с изолятами Е. hirae (53,8±8,0%) (р<0,05), Е. faecalis (14,3±7,6%) и Е. faecium (6,6±3,7%) (р<0,001).
Геном aph(3,)-IIIa, обуславливающим резистентность к аминогликозидам (кроме гентамицина), обладали только 20,0±10,3% штаммов Е. flavescens.
Генетическая детерминанта резистентности к аминогликозидам (кроме гентамицина) ant(4,)-Ia оказалась менее распространена среди штаммов Е. faecium, чем среди культур Е. hirae и Е. faecalis (р<0,001). Частота обнаружения гена ant(4,)-Ia составила для изолятов Е. faecium 20,0±6,0%, для Е. Ы-
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2 rae - 69,2±7,4%, для E. faecalis - 71,4±9,9%.
Ген tetM (резистентность к тетрациклину и миноциклину) зарегистрирован у фекальных изолятов энтерококков всех видов. Данной генетической детерминантой штаммы E. faecalis, E. flavescens и Е. casseliflavus обладали в большем проценте случаев - 42,8±10,8, 20,0±10,3 и 50,0±20,4%, соответственно, по сравнению с культурами видов E. faecium (6,6±3,7%) (р<0,001) и E. hirae (15,3±5,8%) (р<0,05). Штаммы энтерококков, содержащие в геноме ген tetL, не были обнаружены.
Анализ генотипического профиля резистентности Enterococcus sp. к гликопептидам выявил наличие гена vanA, кодирующего резистентность к ванкомицину и тейкопланину, среди 58,3±8,2% культур E. durans и 46,7±7,43% штаммов E. faecium. Менее распространённым данный ген оказался среди изолятов E. faecalis (14,3±7,6%), чем среди культур E. durans и E. faecium (р<0,01). В то же время, только у штаммов E. faecalis был зарегистрирован ген vanB в 14,3±7,6% случаев.
Среди фекальных изолятов E. faecalis, E. flavescens и Е. casseliflavus ген vanCl, кодирующий резистентность к низким концентрациям ванкомицина, обнаружен в 57,1±10,8, 60,0±12,6 и 100% случаев, соответственно. Генетическая детерминанта vanC2/3 выявлена у 100% штаммов E. flavescens и Е. casseliflavus. Достоверно чаще данным геном обладали культуры E. faecalis (57,1±10,8%), чем изоляты E. faecium (6,6±3,7%) (р<0,001).
В результате проведённого исследования установлено, что в геноме энтерококков фекальной микрофлоры животных наиболее распространёнными генетическими детерминантами антибиотикорезистентности являются: tetM (35,1±3,7%), aac(6r)-Ie-aph(2,r)-Ia (33,4±3,7%), ant(4')-Ia (31,5±3,6%) и vanA (29,6±3,6%). Наибольшее количество различных генов антибиотикорези-стентности зарегистрировано в геноме культур E. faecalis.
Корреляционный анализ фено- и генотипических характеристик резистентности бактерий рода Enterococcus к аминогликозидам и гликопептидам показал наличие обратной взаимосвязи (г=-0,625; р<0,001) между присутствием в геноме генетических детерминант резистентности и фенотипическим проявлением признака. У исследуемых культур энтерококков выявлена достоверная положительная связь между наличием генов резистентности к тет-рациклинам и их экспрессией (г=0,685; р<0,001).
Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2015, № 2
Заключение
Результаты определения антибиотикочувствительности культур Entero-coccus sp., выделенных из фекалий клинически здоровых животных, показали, что подавляющее большинство штаммов (от 85,1±2,8 до 96,3±1,5%) сохраняли чувствительность в отношении ванкомицина, ампициллина и аминогликозидов (стрептомицин, гентамицин). Обнаружена значительная доля культур энтерококков, резистентных к фторхинолонам (ципрофлоксацину - 50,0±3,9%, норфлоксацину - 33,3±3,7%, энрофлоксацину - 64,9±3,8%) и линезолиду (53,8±3,9%).
Нами установлены видовые особенности антибиотикорезистентности энтерококков фекальной микрофлоры животных: устойчивость к фторхинолонам в большей степени характерна для культур E. faecium и E. faecalis, резистентность в отношении линезолида распространена среди изолятов E. hirae, E. durans и E. flavescens. Результаты наших исследований по данному вопросу находят своё подтверждение в работе N. Klibi et al. [13], которые выявили чувствительность штаммов энтерококков, выделенных из фекалий продуктивных животных, к ванкомицину и тейкопланину, ампициллину, стрептомицину и гентамицину. Распространённость резистентности к ципрофлоксацину среди культур энтерококков разных видов составила 22-25%.
Анализ генотипического профиля резистентности Enterococcus sp. позволил определить наиболее распространённые генетические детерминанты антибиотикорезистентности: tetM (35,1±3,74%), aac(6')-Ie-aph(2")-Ia (33,4±3,70%), ant(4')-Ia (31,5±3,64%) и vanA (29,6±3,58%). Культуры E. faecalis характеризовались максимальным разнообразием генов резистентности. Полученные сведения согласуются с результатами исследований A.M. Hammerum et al. [5] и R. Del Campo et al. [15], установивших наличие генов tetM и tetL в геноме тетрациклинрезистентных штаммов энтерококков.
Не исключено, что выявленный нами спектр антибиотикорезистент-ности фекальных культур Enterococcus sp. обусловлен природной устойчивостью энтерококков к ряду АБП (цефалоспорины, ß-лактамы, фторхинолоны), связанной с наличием генетических детерминант антибиотикорезистентности.
ЛИТЕРАТУРА
1. Nilsson O. Vancomycin resistant enterococci in farm animals - occurrence and importance. Infect. Ecol. Epidemiol. 2012. 2: 1-8.
2. Lebreton F., Van Schaik W., McGuire A.M. et al. Emergence of epidemic multidrug-resistant Enterococcusfaecium from animal and commensal strains. MBio. 2013. 4: 1-10.
3. Simjee S., White D.G., McDermott P.F. et al. Characterization of Tn1546 in vancomycin-resistant Enterococcus faecium isolated from canine urinary tract infections: evidence of gene exchange between human and animal enterococci. J. Clin. Microbiol. 2002. 40: 46594665.
4. Hammad A.M., Shimamoto T. Genetic characterization of antibiotic resistance and virulence factors in Enterococcus spp. from Japanese retail ready-to-eat raw fish. Food Microbiol. 2014. 38: 62-66.
5. Hammerum A.M. Enterococci of animal origin and their significance for public health. Clin. Microbiol. Infect. 2012. 18: 619-625.
6. Пошвина Д.В., Сычёва М.В. Антибиотикорезистентность клинических изолятов бактерий рода Enterococcus, выделенных от животных. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН [электрон. журнал]. 2014. 3. (URL: http://www.elmag.uran.ru).
7. Jackson C.R., Fedorka-Cray P.J., Barrett J.B. Use of a genus- and species-specific multiplex PCR for identification of enterococci. Journal of Clinical Microbiology. 2004. 42(8): 35583565.
8. Методические указания МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам». М.: Минздрав России, 2005. 62 с.
9. Vakulenko S., Donabedian S.M., Voskresenskiy A.M. et al. Multiplex PCR for detection of aminoglycoside resistance genes in enterococci. Antimicrob. Agents and Chemother. 2003. 47(4): 1423-1426.
10. De Leener E., Martel A., Decostere A. et al. Distribution of the erm(B) gene, tetracycline resistance genes, and Tn1545-like transposons in macrolide- and lincosamide-resistant enterococci from pigs and humans. Microb. Drug Resist. 2004. 10: 341-345.
11. Dutka-Malen S., Evers S., Courvalin P. Detection of glycopeptide resistance genotypes and identification to the species level of clinically relevant enterococci by PCR. J. Clin. Micro-biol. 1995. 33(1): 24-27.
12. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Гос. изд-во мед. лит., 1962. 180 с.
13. Klibi N., Aouini R., Borgo F. et al. Antibiotic resistance and virulence of faecal enterococci isolated from food-producing animals in Tunisia. Ann. Microbiol [electronic journal]. 2014.
14. Hammerum A.M., Fussing V., Aarestrup F.M. et al. Characterization of vancomycin-resistant and vancomycin-susceptible Enterococcus faecium isolates from humans, chickens and pigs by RiboPrinting and pulsed-field gel electrophoresis. J. Antimicrob. Chemother. 2000. 45: 677-680.
15. Del Campo R., Ruiz-Garbajosa P., Sanchez-Moreno M.P. et al. Antimicrobial resistance in recent fecal enterococci from healthy volunteers and food handlers in Spain: genes and phe-notypes. Microb. Drug. Resist. 2003. 9: 47-60.
Поступила 26.06.2015
(Контактная информация: Сычева Мария Викторовна - кандидат биологических
наук, доцент, заведующая кафедрой микробиологии и заразных болезней Оренбургского
государственного аграрного университета; Адрес: 460014 г. Оренбург, ул. Челюскинцев,
18, тел.: 8 (3532) 689713; Е-mail: sycheva maria@mail.ru)
LITERATURA
1. Nilsson O. Vancomycin resistant enterococci in farm animals - occurrence and importance. Infect. Ecol. Epidemiol. 2012. 2: 1-8.
2. Lebreton F., Van Schaik W., McGuire A.M. et al. Emergence of epidemic multidrug-resistant Enterococcus faecium from animal and commensal strains. MBio. 2013. 4: 1-10.
3. Simjee S., White D.G., McDermott P.F. et al. Characterization of Tn1546 in vancomycin-resistant Enterococcus faecium isolated from canine urinary tract infections: evidence of gene exchange between human and animal enterococci. J. Clin. Microbiol. 2002. 40: 4659-4665.
4. Hammad A.M., Shimamoto T. Genetic characterization of antibiotic resistance and virulence factors in Enterococcus spp. from Japanese retail ready-to-eat raw fish. Food Microbiol. 2014. 38: 62-66.
5. Hammerum A.M. Enterococci of animal origin and their significance for public health. Clin. Microbiol. Infect. 2012. 18: 619-625.
6. Poshvina D.V., Sychjova M.V. Antibiotikorezistentnost' klinicheskih izoljatov bak-terij roda Enterococcus, vydelennyh ot zhivotnyh. Bjulleten' Orenburgskogo nauch-nogo centra UrO RAN [jelektron. zhurnal]. 2014. 3. (URL: http://www.elmag.uran.ru).
7. Jackson C.R., Fedorka-Cray P.J., Barrett J.B. Use of a genus- and species-specific multiplex PCR for identification of enterococci. Journal of Clinical Microbiology. 2004. 42(8): 35583565.
8. Metodicheskie ukazanija MUK 4.2.1890-04 «Opredelenie chuvstvitel'nosti mikroor-ganizmov k antibakterial'nym preparatam». M.: Minzdrav Rossii, 2005. 62 s.
9. Vakulenko S., Donabedian S.M., Voskresenskiy A.M. et al. Multiplex PCR for detection of aminoglycoside resistance genes in enterococci. Antimicrob. Agents and Chemother. 2003. 47(4): 1423-1426.
10. De Leener E., Martel A., Decostere A. et al. Distribution of the erm(B) gene, tetracycline resistance genes, and Tn1545-like transposons in macrolide- and lincosamide-resistant enterococci from pigs and humans. Microb. Drug Resist. 2004. 10: 341-345.
11. Dutka-Malen S., Evers S., Courvalin P. Detection of glycopeptide resistance genotypes and identification to the species level of clinically relevant enterococci by PCR. J. Clin. Micro-biol. 1995. 33(1): 24-27.
12. Ashmarin I.P., Vorob'ev A.A. Statisticheskie metody v mikrobiologicheskih issle-dovanijah. L.: Gos. izd-vo med. lit., 1962. 180 s.
13. Klibi N., Aouini R., Borgo F. et al. Antibiotic resistance and virulence of faecal enterococci isolated from food-producing animals in Tunisia. Ann. Microbiol [electronic journal]. 2014.
14. Hammerum A.M., Fussing V., Aarestrup F.M. et al. Characterization of vancomycin-resistant and vancomycin-susceptible Enterococcus faecium isolates from humans, chickens and pigs by RiboPrinting and pulsed-field gel electrophoresis. J. Antimicrob. Chemother. 2000. 45: 677-680.
15.Del Campo R., Ruiz-Garbajosa P., Sanchez-Moreno M.P. et al. Antimicrobial resistance in recent fecal enterococci from healthy volunteers and food handlers in Spain: genes and phe-notypes. Microb. Drug. Resist. 2003. 9: 47-60.
