CC BY
62
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ
в HИКOЛAЕB C.M., PA3yBAEBA Я.Г., BЕPЛAH H.B., TyMyTOBA Э.Ч. — 2011 УДК 615.322
АНКСИОЛИТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ КОМПЛЕКСНОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «АНКСИОФИТ»
Сергей Матвеевич Николаев1,2, Янина Геннадьевна Разуваева2, Надежда Вадимовна Верлан1,
Эржена Чимитдоржиевна Тумутова2 (1Иркутскии государственным институт усовершенствования врачеи, г. Иркутск, ректор — д.м.н., проф. B.B. Шпрах; 2Институт общеи и экспериментальнои биологии СО PAH, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов)
Резюме. Установлено, что экстракт комплексного растительного средства «Анксиофит» оказывает выраженное анксиолитическое деиствие как в условиях наказуемого, так и ненаказуемого поведения. Исследуемое средство достоверно повышает число наказуемых взятии воды в методике конфликтнои ситуации по Vogel, увеличивает число выходов и время пребывания в открытых рукавах приподнятого крестообразного лабиринта, количество переходов и время нахождения в светлом отсеке темнои/светлои камеры.
Ключевые слова: комплексное растительное средство «^н^софт», анксиолитическое деиствие.
ANXIOLYTIC EFFECT OF EXTRACT OF COMPLEX PHYTOREMEDY «ANKSIOFIT»
S.M. Nikolaev, Ya.G. Razuvaeva, N.V. Verlan, E.Ch. Tumutova (1Irkutsk State Institute of Postgraduate Medical Education, Irkutsk; 2Institute of General and Experimental
Biology SB RAS, Ulan-Ude)
Summary. It is established, that the extract of complex phytoremedy «Anksiofit» showed anxiolytic effect, in punishaed and non-punished behaviour conditions. «Anksiofit» authentically raised number of punishable captures of water in Vogel”s method and increased number of outputs and staing period in open branch of ligted crosswise labyrinth, number of transitions and staing period in a light part of dark/light chamber.
Key words: complex phytoremedy «Anksiofit», anxiolytic effect.
В медикаментозном лечении неврозов, тревоги, синдрома хронической усталости, депрессии на сегодняшний день широко применяются средства с анксиолитическим действием. При этом большинство синтетических анк-сиолитиков оказывает побочные эффекты — чрезмерная седация, нарушение координации, внимания, когнитивных функций, мышечная слабость, расстройство сна, головокружение, эмоциональная лабильность, что в конечном итоге нивелирует их терапевтическую эффективность. Препараты растительного происхождения, имеющие существенно меньше побочных эффектов, могут рассматриваться в качестве альтернативной терапии или использоваться для усиления эффективности рецепторных препаратов. Основным же показанием к применению этой категории препаратов являются кратковременные субсиндромальные (мягкие) тревожные расстройства [1,4]. В соответствии с вышеизложенным, разработано новое многокомпонентное растительное средство в форме сухого экстракта, условно названное «Анксиофит». В состав «Анксиофита» входят следующие виды растений: Leonurus cardiac L., Scutellaria baicalensis Georgi, Humus Lupulus L., Crataegus spp., Calendula officinalis L., Rosa spp.
Целью исследования явилось определение анксио-литического влияния сухого экстракта комплексного растительного средства «Анксиофит».
Материалы и методы
Экспериментальная работа выполнена на белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 160-180 г. Животные находились в стандартных условиях содержания и кормления в виварии (Приказ Минздрава СССР №1179 от 10.10.1983 г.). Эксперименты на животных осуществляли в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей. Животные были разделены на 5 групп. В каждую группу
входило по 10 крыс. Животным I-III опытных групп в течение 5 дней до проведения экспериментов вводили внутрижелудочно экстракт «Анксиофита» в дозах 50, 100 и 300 мг/кг соответственно. Крысы четвертой опытной группы получали препарат сравнения — аптечный валерианы экстракт в дозе 120 мг/кг, животные контрольной группы — очищенную воду в эквивалентном объеме по аналогичной схеме введения. Тестирование животных в экспериментальных установках проводили через 1 ч после последнего введения исследуемых средств.
Анксиолитическое действие «Анкиофита» исследовали согласно методическим указаниям по изучению транквилизирующего (анксиолитического) действия новых фармакологических веществ [2] с использованием следующих методик: приподнятый крестообразный лабиринт (ПКЛ), «светло/темная» камера, конфликтная ситуацию в варианте Vogel. В тесте ПКЛ в течение 10 мин регистрировали время пребывания животных в открытых и закрытых рукавах, а также на центральной площадке, количество заходов в открытые и закрытые рукава, свещиваний, вертикальных стоек и актов дефекации. В методике «светло/темная» камера крыс помещали в ярко освещенный отсек двухкамерной светлой/ темной установки и в течение 5 мин регистрировали число переходов между отсеками, а также длительность пребывания в светлом и темном отсеках. Конфликтную ситуацию в варианте Vogel создавали, сталкивая питьевую и оборонительную мотивации, путем подавления болевым электрическим раздражителем питьевого рефлекса. Об анкиолитическом влиянии исследуемых средств судили по числу наказуемых взятий воды животным за 3 мин нахождения в камере.
Значимость различий между указанными параметрами среди опытной и контрольной групп животных оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при р<0,05 [3].
Таблица 1
Влияние экстракта комплексного растительного средства «Анксиофит» и валерианы экстракта на поведение белых крыс в крестообразном лабиринте
Показатели Группы животных
Контроль «Анксиофит» ВЭ,120 мг/кг
50 мг/кг 100 мг/кг 300 мг/кг
Количество заходов Темный отсек 2,6±0,4 5,3±0,5* 7,8±0,8* 2,8±0,2 5,3±0,7*
Светлый отсек 0,9±0,2 2,0±0,3* 3,6±0,4* 3,4±0,2* 2,0±0,2*
Время пребывания, с Темный отсек 556±14,3 458±45,1 387±38,2 455±38,2 501±45,0
Светлый отсек 26,2±5,12 118,3±21,1* 187,0±24,0* 123,0±2,9 76,0±11,0*
Централплощадка 17,0±2,14 22,8±3,72 26,0±2,74 22,0±2,45 22,8±3,72
Количество вертикальных стоек 3,12±0,6 6,0±0,9* 7,8±0,8* 6,2±0,6* 6,0±0,9*
Число свешиваний 2,1±0,6 2,9±0,9 3,3±1,0 3,2±1,3 3,0±0,3
Количество актов груминга 1,5±0,2 0,9±0,1 0,8±0,1 0,2±0,01 1,5±0,2
Дефекации 1,7±0,09 0,4±0,05* 0,5±0,04* 0,3±0,02* 1,7±0,01*
Примечание: здесь и далее * — различия статистически значимы между опытной и контрольной группами при р<0,05; ВЭ — валерианы экстракт.
Результаты и обсуждение
Результаты тестирования животных в ПКЛ показали (табл.1), что контрольные животные большую часть времени проводили в закрытых рукавах, чем открытых. Курсовое введение животным «Анксиофита» в дозах 50, 10о и 300 мг/кг подавляло у них чувство страха открытого пространства, в результате чего количество заходов в открытый рукав установки у крыс данных групп было выше в 2,0; 3,0 и 3,8 раза аналогичного показателя в контроле. Время пребывания в открытых рукавах установки у животных 1-1У опытных групп было выше такового показателя у крыс контрольной группы в 4,5; 7,1; 4,7 и 2,9 раза соответственно. При этом наибольшее время пребывания в открытом рукаве отмечалось у животных, получавших «Анксиофит» в дозах 100 и 300 мг/ кг. Время нахождения на центральной площадке, являющееся показателем принятия решения, у крыс опытных и контрольной групп значимо не отличалось (табл. 1).
Таблица 2
Влияние экстракта растительного средства «Анксиофит» и валерианы экстракта на поведение белых крыс в темно-светлой камере
Группы животных Показатели
Количество переходов Время пребывания в светлом отсеке, сек Время пребывания в темном отсеке, сек
Контрольная(H2O) 4,0±0,3 30,0±3,9 270,0±5,7
50 мг/кг 5,2±0,5 60,5±4,7* 239,5±6,9*
«Анксиофит» 100 мг/кг 5,7±0,3* 65,3±9,3* 234,7±9,3*
300 мг/кг 6,2±0,6* 69,0±6,9* 231,0±10,6*
ЭВ, 200 мг/кг 3,6±0,4 20,8±2,7 279,2±4,1
У животных, получавших «Анксиофит» и валерианы экстракт, в ПКЛ наблюдалась и более высокая общая двигательная активность по сравнению с контрольными животными: увеличилось количество вертикальных
стоек и свешиваний в среднем в 2,0 и 1,5 раза соответственно по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы (табл.1). Увеличение исследовательской активности и понижение чувства страха и тревоги у животных опытных групп можно объяснить снижением у них уровня эмоциональности (табл.1). Так, у крыс опытных групп количество актов дефекаций было ниже аналогичного показателя у контрольных животных в среднем в 4,0 раза. Количество актов грумига у животных, получавших «Анксиофит» в дозе 50, 100 и 300 мг/кг было в 1,7; 1,9 и 7,5 раз меньше такового показателя у животных контрольной группы.
Результаты исследований, представленные в таблице 2, показывают, что введение животным экстракта «Анксиофит» в дозах 50, 100 и 300 мг/кг увеличивает количество переходов между отсеками на 30, 43 и 55 % соответственно, и повышает время пребывания в светлом отсеке в среднем в 2,0 раза по сравнению с данными у животных контрольной группы.
При моделировании конфликтной ситуации по Vogel было выявлено (табл. 3), что курсовое введение «Анксиофита» в дозах 50, 100 и 300 мг/кг и валерианы экстракта в дозе 120 мг/кг устраняет чувство тревоги и
Таблица 3
Влияние экстракта растительного средства «Анксиофит» и валерианы экстракта на поведение крыс в конфликтной ситуации в методике конфликтной ситуации по Vogel
Группы животных Количество наказуемых взятий воды из поилки
Контроль 1,0±0,32
50 мг/кг 5,3±0,81*
«Анксиофит» 100 мг/кг 5,8±0,48*
300 мг/кг 7,0±1,29*
ВЭ, 120 мг/кг 5,6±1,45*
страха, увеличивая число наказуемых взятий воды в 5,3; 5,8; 7,0 и 5,6 раза соответственно по сравнению с таковым показателем у контрольных животных.
Таким образом, курсовое введение животным экстракта комплексного растительного средства «Анксиофит» оказывает выраженное анксиолитическое действие в условиях как наказуемого, так и ненаказуемого поведения. Исследуемое средство достоверно повышает число наказуемых взятий воды в методике конфликтной ситуации по Vogel, увеличивает число выходов и время пребывания в открытых рукавах приподнятого крестообразного лабиринта, количество переходов и время нахождения в светлом отсеке темной/светлой камеры. Данный эффект сопоставим с таковым у препарата сравнения — валерианы экстракта.
ЛИТЕРАТУРА
1. Воробьева О.В., Акарачкова Е.С. Применение комбинированных растительных препаратов при тревожных расстройствах // Фарматека. — 2007. — № 7. — С. 47-50.
2. Воронина Т.А., Середенин С.Б. Методические указания по изучению транквилизирующего (анксиоли-
тического) действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — М., 2005. — С. 253-263.
3. Сергиенко В.И., Бондаренко И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. — М., 2006. — 256 с.
4. Ушкалова А.В., Илларионова Т.С. Эффективность растительного происхождения // Фармация. — 2008. —
и безопасность антидепрессивных и седативных средств № 20. — С. 10-14.
Информация об авторах: 670013, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, ИОЭБ СО РАН, ОБАВ, e-mail: smnikolaev@mail.ru, тел. (3012) 433463.
Николаев Сергей Матвеевич — д.м.н., профессор, заведующий отделом,
Разуваева Янина Геннадьевна — к.б.н., научный сотрудник,
Надежда Вадимовна Верлан — д.м.н., профессор, декан,
Тумутова Эржена Чимитдоржиевна — аспирант.
© МАРТЫНОВ А.М., ТОКАРЕВА М.Н., ЧУПАРИНА Е.В. — 2011 УДК 615.322:582.681
ФЕНОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И ЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ ПОЧЕК ОСИНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (POPULUSTREMULA L.)
Альберт Михайлович Мартынов1, Мария Николаевна Токарева1, Елена Владимировна Чупарина2 ('Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах, кафедра фармации, зав. — д.ф.н., проф. Г.Н. Ковальская; 2Институт геохимии им. А.П. Виноградова СО РАН,
директор — акад. РАН М.И. Кузьмин)
Резюме. Изучены фенольные соединения и элементный состав почек осины обыкновенной. Методом ВЭЖХ идентифицированы: гликозид салицин; фенолкарбоновые кислоты: галловая, цикориевая, неохлорогеновая; фла-воноиды: гесперидин, лютеолин-7-гликозид, а также эпикатехин, эпигаллокатехингаллат. Преобладающими являются салицин, галловая кислота и лютеолин-7-гликозид. Методом рентгенофлуоресцентного анализа определено содержание 21 элемента: Na, Mg, Al, Si, P, S, Cl, K, Ca, Ti, Cr, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn, Br, Rb, Sr, Ba, Pb.
Ключевые слова: осина обыкновенная, фенольные соединения, рентгенофлуоресцентный анализ.
PHENOL COMPOUNDS AVD ELEMENT COMPOSITION OF BUDS OF COMMON ASPEN (POPULUS TREMULA L.)
A.M. Martynov1, M.N. Tokareva1, E.V. Chuparina2 (‘Irkutsk State Institute for Postgraduate Medical Education; 2Vinogradov Institute of Geochemistry,
Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences)
Summary. Phenol compounds and the element composition of buds of the common aspen have been studied. The following compounds were identified by HPLC method, such as: glycoside salicin, phenol carbonic acids: gallic, chicori, neochlorogenic; flavonoids: hesperidin, luteolin-7-glycoside as well as epicatechin and epigallocatechingallate. Salicin, gallic acid and luteolin-7-glykoside are abundant. X-ray fluorescence spectrometry was applied to determine twenty one elements: Na, Mg, Al, Si, P, S, Cl, K, Ca, Ti, Cr, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn, Br, Rb, Sr, Ba and Pb.
Key words: common aspen, phenol compounds, x-ray fluorescence analysis.
Одним из источников получения новых лекарственных средств являются растения, применяемые в народной медицине. Осина обыкновенная широко распространена на территории РФ и используется населением в лечебных целях [3, 4, 7]. Почки осины применяют в виде настоя при ревматизме и подагре, а также при инфекционных заболеваниях в качестве жаропонижающего. Измельченные почки осины используют наружно в виде мази и настойки для заживления ран, хронических язв и ушибов, растираний при артритах, подагре и других патологиях. Химический состав почек мало изучен — это и послужило основанием для исследования данного растительного объекта.
Цель работы: исследование фенольных соединений и элементного состава почек осины обыкновенной.
Материалы и методы
Объектом исследования служили почки осины обыкновенной — Populus tremula L., семейства ивовых (Salicaceae), заготовленные в Эхирит-Булагатском районе.
Качественными реакциями в растительном объекте обнаружены флавоноиды и фенольные кислоты. Состав этой группы соединений изучался с использованием химических и физико-химических методов (БХ, ТСХ, ВЭЖХ и УФ-спектроскопия) [1, 2].
Детально качественный состав фенольных соединений исследовали на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы “GILSON”, модель 305 (Франция) с последующей компьютерной обработкой результатов с помощью программы “MultiChrom for Windows”. В качестве неподвижной фазы была использована металли-
ческая колонка размером 4,6х250 мм Kromasil C 18, размер частиц сорбента 5 мкм, подвижной фазой служила система: метанол-вода-фосфорная кислота концентрированная, в соотношении 400:600:5. Анализ выполняли при комнатной температуре со скоростью подачи элю-ента 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа составляла 70 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора “GILSON” UV/VIS модель 151, при длине волны 254 нм.
Почки осины измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм. В колбу объемом 250 мл помещали 5,0 г сырья, прибавляли 50 мл 70% спирта этилового, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали в течение 2 часов с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. Смесь охлаждали, фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объемом 50 мл. Объем извлечения доводили до метки 70% спиртом этиловым, перемешивали и фильтровали (получили исследуемый раствор). Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения фенолкар-боновых кислот, флавоноидов и кумаринов в 70% спирте этиловом. Для хроматографирования использовали по 50 мкл исследуемого раствора и растворов сравнения. Идентификация разделяемых веществ проводилась путем сопоставления времени удерживания компонентов смеси со временами удерживания стандартных образцов. Количественное определение идентифицированных веществ в исследуемом образце проводили по площадям пиков методом внутренней нормализации.
Элементный состав почек осины определяли с использованием рентгенофлуоресцентного анализа (РФА), к достоинствам которого относятся надежность
